[发明专利]基于平板培养基的皮革材料的抑菌效果检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种测试方法，具体的涉及一种基于平板培养基的皮革材料的抑菌效果检测方法。

背景技术

人类的生活环境中存在着大量肉眼看不见的微生物，包括各种各样的细菌和真菌。在一般情况下，人们皮肤上的一些常驻菌起着保护皮肤免受致病菌危害的作用，但一旦机体免疫力下降，加上脱落的皮屑、分泌的汗液以及适宜的温湿度又能为细菌的繁殖提供良好的环境，它们中的少量致病菌就会大量繁殖，造成皮肤上菌群生态平衡的失调，侵入皮肤引起疾病。

皮革制品作为消费量最大的革制品，由于汗和灰尘等原因，更利于真菌的滋生，因此，皮革制品像纺织品和公用设施等一样，在使用过程中也需要赋予抗菌性，以抑制细菌等的生长，阻断疾病的传播。

目前，皮革制品的抗菌性能研究较少，同时缺少较好的抑菌效果检测方法。但随着人们生活水平的提高，对皮革产品不仅要求防水、防污、耐光可洗，也像纤维制品一样，要求赋予皮革抗菌功能。

发明内容

为克服现有技术中不足，本发明的目的在于提供一种基于平板培养基的皮革材料的抑菌效果检测方法，该检测方法操作简单，结果准确，重复性好，具有较高应用价值。

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明采用了以下技术方案：

一种基于平板培养基的皮革材料的抑菌效果检测方法，其包括以下步骤：

步骤1)制备试样

将样品剪成正方形，正反两面均在紫外下照射30min灭菌；

步骤2)制备2，3，5-氯化三苯基四氮唑固体培养基

用常规培养基配制方法配制固体培养基，按2/100000加入2，3，5-氯化三苯基四氮唑，后塞上棉塞，121℃，灭菌20min；

步骤3)制备接种菌悬液

取培养好的菌悬液各0.5ml加入4.5ml灭菌的生理盐水试管中，即稀释至10^-1的浓度，充分混匀后取10^-1浓度的菌悬液0.5ml加入另一只4.5ml灭菌的生理盐水试管中，即稀释至10^-2的浓度，依次类推，直至稀释至10^-4的浓度的接种菌悬液；

步骤4)检测操作

4.1)向已灭好菌的平皿中倒入2，3，5-氯化三苯基四氮唑固体培养基15～25ml，室温凝固；

4.2)取制备好的接种菌悬液0.1ml加到2，3，5-氯化三苯基四氮唑固体培养基表面，用无菌涂布棒涂布均匀，室温静5～10min；

4.3)将试样平贴在培养基上，功能面朝下，用镊子轻压试样，使其紧贴于培养基表面；各样品边缘相距1.5cm以上，与平皿边缘也相距1.0cm以上；每样均做4～6个平行；

4.4)倒置平皿，于生化培养箱中培养，其中，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌37℃±1℃培养18～24h；白色念珠菌28±1℃培养24～48h；

4.5)于体式显微镜或显微镜下观察菌落生长情况；

步骤5)评价与报告

试样抑菌率按下式(1)计算：

Y=Xa-XbXa×100%---(1)]]>

式中：Y为抑菌率，100％；Xa为未经抗菌处理试样菌落数平均值，单位为cfu；Xb为抗菌处理试样菌落数平均值，单位为cfu。

进一步的，所述菌悬液的制备方法如下：从保存于4℃冰箱的菌种斜面中取一接种环菌，在平板培养基上划线，37℃±1℃，培养18～24h；取液体培养基20ml放入100ml三角瓶中；用接种环从已培养18～24h的平皿中挑取一个典型的菌落，接种到液体培养基中，37℃±1℃，130r/m振荡培养18～20h，即为菌悬液。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：