[发明专利]一种通过DL-氨基酸去消旋化制备D-氨基酸的生物催化方法

摘要

本发明提供一种通过DL-氨基酸去消旋化制备D-氨基酸的生物催化方法。以经通透性处理后的粪产碱杆菌细胞为生物催化剂，利用其中的L-氨基酸氧化酶在空气存在下将DL-氨基酸的L-对映体特异性氧化脱氨为相应的酮酸，D-对映体保留，同时利用共表达的过氧化氢酶分解反应过程中产生的过氧化氢。本发明的方法避免了传统拆分方法的衍生和去衍生步骤，具有过程简单、成本低廉，产品光学纯度高，环境友好的特点，适合D-氨基酸的工业化生产。

主权项

一种通过DL‑氨基酸去消旋化制备D‑氨基酸的方法，其特征在于：以DL‑氨基酸为原料，通过以下步骤获得所述DL‑氨基酸中的D‑对映体：a）细胞培养：将粪产碱杆菌菌株接种到培养基中，采用所述DL‑氨基酸中的L‑对映体作为诱导剂加入培养基中，30℃下培养24h，离心，获得湿菌体；b）细胞通透性处理：采用丙酮对步骤a）所获得的湿菌体处理5～20min，离心，用生理盐水洗涤，获得通透性细胞；c）酶催化反应：将步骤b）所获得的通透性细胞加入蒸馏水中，使其悬浮，加入所述原料，30℃下反应24～72h，使原料DL‑氨基酸中的L‑对映体氧化脱氨形成酮酸；d）D‑氨基酸分离：将步骤c）的反应液离心除去细胞，所获得的离心液加入盐酸酸化至pH2～3，浓缩至干，得D‑氨基酸盐酸盐；将所述D‑氨基酸盐酸盐溶于乙醇中，过滤，向滤液中加入环氧丙烷以脱除盐酸，室温下搅拌30min，过滤，固体用无水乙醇洗涤，烘干，得对映纯D‑氨基酸。