[发明专利]一种通过DL-氨基酸去消旋化制备D-氨基酸的生物催化方法

权利要求书

1.一种通过DL-氨基酸去消旋化制备D-氨基酸的方法，其特征在于：以DL-氨基酸为原料，通过以下步骤获得所述DL-氨基酸中的D-对映体：

a）细胞培养：将粪产碱杆菌菌株接种到培养基中，采用所述DL-氨基酸中的L-对映体作为诱导剂加入培养基中，30℃下培养24h，离心，获得湿菌体；

b）细胞通透性处理：采用丙酮对步骤a）所获得的湿菌体处理5～20min，离心，用生理盐水洗涤，获得通透性细胞；

c）酶催化反应：将步骤b）所获得的通透性细胞加入蒸馏水中，使其悬浮，加入所述原料，30℃下反应24～72h，使原料DL-氨基酸中的L-对映体氧化脱氨形成酮酸；

d）D-氨基酸分离：将步骤c）的反应液离心除去细胞，所获得的离心液加入盐酸酸化至pH2～3，浓缩至干，得D-氨基酸盐酸盐；将所述D-氨基酸盐酸盐溶于乙醇中，过滤，向滤液中加入环氧丙烷以脱除盐酸，室温下搅拌30min，过滤，固体用无水乙醇洗涤，烘干，得对映纯D-氨基酸。

2. 如权利要求1所述的一种通过DL-氨基酸去消旋化制备D-氨基酸的方法，其特征在于：所述原料DL-氨基酸选自DL-丙氨酸、DL-亮氨酸、DL-缬氨酸、DL-蛋氨酸、DL-丝氨酸、DL-天冬氨酸、DL-谷氨酸、DL-苯丙氨酸、DL-酪氨酸、DL-色氨酸、DL-赖氨酸或DL-鸟氨酸；其中

步骤a）中，所述L-对映体是与所述原料具有相同R基的L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-缬氨酸、L-蛋氨酸、L-丝氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-色氨酸、L-赖氨酸或L-鸟氨酸。

3.如权利要求1所述的一种通过DL-氨基酸去消旋化制备D-氨基酸的方法，其特征在于：步骤a）中粪产碱杆菌菌株选自Alcaligens faecali 1.767、1.924、1.1799、1.7686、1.2006、1.1837。

4.如权利要求1所述的一种通过DL-氨基酸去消旋化制备D-氨基酸的方法，其特征在于：步骤b）中所述丙酮溶液的浓度为30%。

5.如权利要求1所述的一种通过DL-氨基酸去消旋化制备D-氨基酸的方法，其特征在于：步骤c）中，所述原料浓度为0.02～0.2mol/L。

6.如权利要求1所述的一种通过DL-氨基酸去消旋化制备D-氨基酸的方法，其特征在于：步骤d）中，所述环氧丙烷与DL-氨基酸的摩尔比为2～2.4∶1。