[发明专利]用于纯化含FC的蛋白的色谱方法有效
申请号: | 201180006652.0 | 申请日: | 2011-01-21 |
公开(公告)号: | CN102712673A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | C.埃克曼;D.安布罗修斯;F.诺希尔佛;T.拉思詹 | 申请(专利权)人: | 贝林格尔.英格海姆国际有限公司 |
主分类号: | C07K1/22 | 分类号: | C07K1/22;C07K16/00 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 邹宗亮 |
地址: | 德国英*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | 本发明涉及一种去除杂质的方法,具体为利用新的清洗缓冲液通过A蛋白色谱的方法从细胞培养上清液中除去宿主细胞蛋白(HCP)和DNA的方法。 | ||
搜索关键词: | 用于 纯化 fc 蛋白 色谱 方法 | ||
【主权项】:
通过A蛋白色谱从含有包含免疫球蛋白的Fc域的蛋白(靶蛋白)的组合物中去除杂质的方法,所述方法包括以下步骤:a.在其中靶蛋白结合至固定相的条件下,将含该靶蛋白的流动相上样至含A蛋白的固定相;b.施用pH在4至8之间的清洗缓冲液作为流动相,其含有以下成分:i.精氨酸,其浓度为0.1‑1mol/l,ii.氯化钠,其浓度为0.2至2mol/l,iii.选自异丙醇、正丙醇和乙醇的醇,其浓度为5‑30%(w/v),和iv.聚乙烯吡咯烷酮或去污剂,其浓度为0.05‑2%(w/v);c.在其中靶蛋白从固定相洗脱的条件下,使用洗脱缓冲液作为流动相。
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