[发明专利]用于纯化含FC的蛋白的色谱方法

权利要求书

1.通过A蛋白色谱从含有包含免疫球蛋白的Fc域的蛋白(靶蛋白)的组合物中去除杂质的方法，所述方法包括以下步骤：

a.在其中靶蛋白结合至固定相的条件下，将含该靶蛋白的流动相上样至含A蛋白的固定相；

b.施用pH在4至8之间的清洗缓冲液作为流动相，其含有以下成分：

i.精氨酸，其浓度为0.1-1mol/l，

ii.氯化钠，其浓度为0.2至2mol/l，

iii.选自异丙醇、正丙醇和乙醇的醇，其浓度为5-30%(w/v)，和

iv.聚乙烯吡咯烷酮或去污剂，其浓度为0.05-2%(w/v)；

c.在其中靶蛋白从固定相洗脱的条件下，使用洗脱缓冲液作为流动相。

2.权利要求1的方法，其特征在于所述精氨酸在所述清洗缓冲液中的浓度为0.4-0.6mol/l。

3.前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述氯化钠在所述清洗缓冲液中的浓度为0.9-1.1mol/l。

4.前述权利要求中任一项的方法，其特征在于在所述清洗缓冲液中所述醇为异丙醇，且其浓度为10-20%(w/v)。

5.前述权利要求中任一项的方法，其特征在于聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的浓度为0.1-2%(w/v)。

6.前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述去污剂为聚氧乙烯-脱水山梨糖醇-单月桂酸酯，且其浓度为0.05-2%(w/v)。

7.前述权利要求中任一项的方法，其特征在于所述清洗缓冲液的pH为5至8。

8.前述任一权利要求的方法，其特征在于所述杂质为宿主细胞蛋白(HCP)。

9.用于亲和性色谱的清洗缓冲液，其pH为4至8，其包含：

i.精氨酸，其浓度为0.1-1mol/l，

ii.氯化钠，其浓度为0.2至2mol/l，

iii.选自异丙醇、正丙醇和乙醇的醇，其浓度为5-30%(v/v)，和

iv.聚乙烯吡咯烷酮或去污剂，其浓度为0.05-2%(w/v)。

10.权利要求9的清洗缓冲液，其pH为5至8。