[发明专利]鸡球虫ADF重组卡介苗及制备方法有效
| 申请号： | 201110439688.X | 申请日： | 2011-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN102552893A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 张西臣;李建华;李运娜;宫鹏涛;程柏淇;张国才;杨举;李赫;陈玉江;任文陟 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | A61K39/012 | 分类号： | A61K39/012;C12N15/66;A61P33/02 |
| 代理公司： | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人： | 陈宏伟 |
| 地址： | 130012 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种鸡球虫ADF重组卡介苗，同时还提供了该疫苗的制备方法，获得鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊，提取RNA，反转录成cDNA，根据已克隆的柔嫩艾美耳球虫ADF基因序列的开放阅读框设计引物进行PCR，与PMD-18T载体连接进行克隆，测序鉴定正确后，酶切回收目的片段，再分别与用同种酶进行酶切反应的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体PMV261和整合表达载体PMV361相连，连接正确的重组质粒转化到BCG中，经抗性筛选和PCR鉴定，获得阳性鸡柔嫩艾美耳球虫重组卡介苗。该活载体疫苗稳定性好，运输和保存较为容易，易于生产,产品不需纯化，可直接用于免疫保护试验.免去了蛋白质后处理的复杂工序，从而大大降低了成本，适宜于广大农村。 | ||
| 搜索关键词： | 鸡球虫 adf 重组 卡介苗 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种鸡球虫ADF重组卡介苗，是通过以下方法制成的：首先获得鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊，提取RNA，反转录成cDNA，根据已克隆的柔嫩艾美耳球虫ADF基因序列的开放阅读框设计引物进行PCR，与PMD‑18T载体连接进行克隆，测序鉴定正确后，酶切回收目的片段，再分别与用同种酶进行酶切反应的大肠杆菌‑分枝杆菌穿梭表达载体PMV261和整合表达载体PMV361相连，连接正确的重组质粒转化到BCG中，经抗性筛选和PCR鉴定，获得阳性鸡柔嫩艾美耳球虫重组卡介苗。
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