[发明专利]过表达单一MicroRNA成熟体序列的新方法有效
| 申请号： | 201110359200.2 | 申请日： | 2011-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN103103189A | 公开（公告）日： | 2013-05-15 |
| 发明（设计）人： | 沈南;曲波 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200031 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及过表达单一MicroRNA成熟体序列的新方法。本发明首次提供了一种全新的单一microRNA成熟体表达策略，通过对表达构建物的“茎”部位的碱基互补、配对的巧妙设计，使得表达构建物能够形成茎环结构但不表达另一microRNA成熟体序列，从而专一性表达单一microRNA。本发明克服了现有技术中难以特异性表达microRNA两条成熟序列中的一条的技术难题。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 单一 microrna 成熟 序列 新方法 | ||
【主权项】：
1.一种表达单一microRNA成熟体的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)提供一种表达构建物，所述的表达构建物含有以下结构：5’Seq正向-Y-Seq反向3’ (I)；其中，Seq反向为该单一microRNA成熟体相应的DNA序列；Seq正向为与Seq反向互补的序列；Y为位于Seq正向和Seq反向之间的间隔序列，并且所述间隔序列与Seq正向和Seq反向不互补；式I所示的结构可形成如下所示的二级结构：![]()
其中，“|”表示在Seq正向和Seq反向中，相应的核苷酸是配对的，在Seq正向和Seq反向之间形成氢键；![]()
表示在Seq正向和Seq反向中，相应的核苷酸不配对；并且，“|”和![]()
的分布构成了Seq反向与Seq正向的互补；(2)将(1)的表达构建物转化细胞，从而表达单一microRNA成熟体。
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