[发明专利]BCL2基因3-UTR双荧光素酶报告基因质粒及其构建方法和用途无效
| 申请号： | 201110325905.2 | 申请日： | 2011-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN103060355A | 公开（公告）日： | 2013-04-24 |
| 发明（设计）人： | 范忠泽;肖海娟;许建华;刘建文;孙珏;崔大苓;徐可;梁欣;李琦;殷佩浩;高虹;赵成根;陆海;金泉克;王国娟;余文燕;朱晏伟;张勇 | 申请（专利权）人： | 上海中医药大学附属普陀医院;华东理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/66;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 20006*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生物技术领域，涉及BCL2基因3-UTR双荧光素酶报告基因质粒及其构建方法。本发明通过将凋亡抑制基因BCL2的3-UTR区域插入双荧光素酶报告质粒pGL3-promoter的Xba I位点，构建包含BCL2的3-UTR区域的双荧光素报告基因质粒pGL3-p-BCL2-3-UTR，用于检测hsa-mir-1915对BCL2基因的调控作用，从而便于对细胞内microRNA调控的检测。本发明检测细胞内hsa-mir-1915的表达，从而标示细胞内特异的microRNA表达水平，为细胞内microRNA检测提供新的研究方法；所构建的BCL2基因的3-UTR区双荧光素酶报告基因质粒可用于检测细胞内hsa-mir-1915对BCL2基因的调控作用；进一步用于microRNA的抗肿瘤研究中，具有极佳的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | bcl2 基因 utr 荧光 报告 质粒 及其 构建 方法 用途 | ||
【主权项】：
一种凋亡抑制基因BCL2的3‑UTR区双荧光素酶报告基因质粒，其特征是，通过下述方法构建：根据生物信息学数据库miRDB预测hsa‑mir‑1915与BCL2结合的靶位点，将其中的包含人BCL2基因的3‑UTR区的序列扩增，插入双荧光素酶报告基因质粒pGL3‑promoter的Xba I位点，构建BCL2的3‑UTR区双荧光素酶报告基因质粒；所述的BCL2基因的3‑UTR区具有序列1的结构。
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