[发明专利]一种从泥螺中提取糖胺聚糖的方法

摘要

本发明涉及一种从泥螺中提取糖胺聚糖的方法，其主要技术特点是采用渤海湾广泛分布的低值贝类-泥螺作为糖胺聚糖的提取原材料，其提取制方法为：将泥螺去壳后称重，加水制成匀浆液，在匀浆液中加入胰蛋白酶酶解，将酶解液离心除去沉淀，上清液加双氧水脱色，离心，调pH值，离心除去酸性、中性蛋白质，上清液醇沉，得粗糖胺聚糖粗品，得率为1.22％，粗品加超纯水溶解，超滤，醇沉，加入CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)，离心，将沉淀溶于NaCl溶液中，得解离液，再超滤、醇沉，回收较高纯度糖胺聚糖。本方法反应条件温和、糖胺聚糖得率及纯度高，与其他贝类的糖胺聚糖提取相比，工艺简化，时间缩短，得到的糖胺聚糖纯度可达90％。

主权项

一种从泥螺中提取糖胺聚糖的方法，其特征在于：提取包括以下步骤：(1)原料处理：将泥螺去壳，软体部分洗净后，加入2‑2.5倍体积的蒸馏水匀浆，形成匀浆液；(2)酶解：向上述匀浆液中加胰蛋白酶，在45℃水浴条件下酶解7‑8小时，酶解液煮沸灭酶后，4000r/min离心10min，取上清液；(3)脱色：加入双氧水脱色；(4)调pH值去沉淀：先用HCl调pH至2.0，离心除去沉淀；再用NaOH调pH至7.0，离心除去沉淀；(5)醇沉法提取粗糖胺聚糖：上清液在不断搅拌下缓缓加入乙醇至醇含量为60％，于4℃条件下静置24小时，移去上清液，4000r/min离心10min后回收粗糖胺聚糖；(6)超滤：将粗糖胺聚糖溶于蒸馏水，配成1％糖液，4000r/min离心10min除去不溶物后进行超滤；(7)溶液络合后解离：加入3倍体积的5％CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)，40℃下沉淀1‑2小时，8000r/min离心30min，收集沉淀，40℃下将沉淀溶于2mol/L的NaCl溶液，使GAG‑CTAB络合物解离，形成解离液；(8)醇沉、超滤、再醇沉：上述解离液加入乙醇，使醇量达60％，8000r/min离心10min，收集沉淀，将沉淀溶于蒸馏水，用中空纤维膜超滤，在超滤后的溶液中加入乙醇‑乙酸钠试剂，使醇量达60％，按醇沉法回收糖胺聚糖，将沉淀物烘干，即制得纯泥螺糖胺聚糖。