[发明专利]一种从泥螺中提取糖胺聚糖的方法

权利要求书

1.一种从泥螺中提取糖胺聚糖的方法，其特征在于：提取包括以下步骤：

(1)原料处理：将泥螺去壳，软体部分洗净后，加入2-2.5倍体积的蒸馏水匀浆，形成匀浆液；

(2)酶解：向上述匀浆液中加胰蛋白酶，在45℃水浴条件下酶解7-8小时，酶解液煮沸灭酶后，4000r/min离心10min，取上清液；

(3)脱色：加入双氧水脱色；

(4)调pH值去沉淀：先用HCl调pH至2.0，离心除去沉淀；再用NaOH调pH至7.0，离心除去沉淀；

(5)醇沉法提取粗糖胺聚糖：上清液在不断搅拌下缓缓加入乙醇至醇含量为60％，于4℃条件下静置24小时，移去上清液，4000r/min离心10min后回收粗糖胺聚糖；

(6)超滤：将粗糖胺聚糖溶于蒸馏水，配成1％糖液，4000r/min离心10min除去不溶物后进行超滤；

(7)溶液络合后解离：加入3倍体积的5％CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)，40℃下沉淀1-2小时，8000r/min离心30min，收集沉淀，40℃下将沉淀溶于2mol/L的NaCl溶液，使GAG-CTAB络合物解离，形成解离液；

(8)醇沉、超滤、再醇沉：上述解离液加入乙醇，使醇量达60％，8000r/min离心10min，收集沉淀，将沉淀溶于蒸馏水，用中空纤维膜超滤，在超滤后的溶液中加入乙醇-乙酸钠试剂，使醇量达60％，按醇沉法回收糖胺聚糖，将沉淀物烘干，即制得纯泥螺糖胺聚糖。

2.根据权利要求1所述的从泥螺中提取糖胺聚糖的方法，其特征在于：所述步骤(2)中胰蛋白酶的添加量为匀浆液总重量的0.8-1％。

3.根据权利要求1所述的从泥螺中提取糖胺聚糖的方法，其特征在于：所述步骤(3)中双氧水的添加量为上清液重量的6-8％。