[发明专利]一种溶菌酶分子印迹-量子点纳米荧光探针的制备方法

摘要

一种溶菌酶分子印迹-量子点纳米荧光探针的制备方法，是以量子点为载体，溶菌酶为模板分子，在量子点表面修饰一层分子印迹聚合物，结合分子印迹技术的选择性和量子点的荧光特性合成的新型荧光探针；步骤如下：量子点的制备、通过变性的牛血清蛋白修饰量子点的表面、选择功能单体和交联试剂引发聚合在量子点形成分子印迹层、选择洗脱液洗去模板分子。本发明的优点：该荧光探针将分子印迹准确专一的识别特性和量子点荧光检测的高灵敏性相结合，对模板分子的识别具有有较高的选择性和灵敏性；该合成方法过程简单，不同批次间重现性较好，在实际样品中溶菌酶的选择性识别和检测中有着良好的应用前景。

主权项

一种溶菌酶分子印迹‑量子点纳米荧光探针的制备方法，其特征在于：是以碲化镉量子点为载体，溶菌酶(N‑乙酰胞壁质聚糖水解酶)为模板分子，结合分子印迹技术的选择性和量子点的荧光特性合成的纳米荧光探针，包括如下步骤：1)将碲粉(Te)、NaBH4与蒸馏水混合，在氮气保护并搅拌的条件下进行还原反应制得NaHTe溶液，将制得的NaHTe溶液快速加入到巯基丙酸(MPA)的CdCl2溶液中，用NaOH水溶液调节溶液的pH为9.0，然后沸水浴加热所述溶液2h，即可制得碲化镉量子点溶液；2)将牛血清白蛋白溶于蒸馏水中，加入硼氢化钠，搅拌1小时，然后在70℃水浴中加热30分钟，得到变性牛血清白蛋白(dBSA)溶液，将dBSA溶液加入到碲化镉量子点溶液中，磁力搅拌24小时，得到dBSA包覆的量子点溶液；3)在dBSA包覆的量子点溶液中依次加入模板分子溶菌酶、功能单体3‑氨丙基三乙氧基丙烷、交联剂正硅酸乙酯和氨水，室温下磁力搅拌12小时，通过溶胶凝胶水解聚合反应在量子点形成分子印迹层，即为探针；4)用十二烷基硫酸钠水溶液与探针混合，振荡20‑60分钟，离心去除上清液，重新用上述十二烷基硫酸钠溶液洗涤，重复此过程，直到用紫外分光光度计检测模板分子洗净为止，即可制得溶菌酶分子印迹‑量子点纳米荧光探针。