[发明专利]一种检测结核分枝杆菌异烟肼耐药基因突变的方法及试剂盒

摘要

本发明属于生物医药体外诊断试剂技术领域，具体为一种检测结核分枝杆菌异烟肼耐药基因突变的方法及试剂盒。本发明的试剂盒包括一个以荧光定量PCR技术为基础的二重聚合酶链式反应，包含针对结核分枝杆菌主要的异烟肼耐药基因核酸片段的PCR正反向扩增引物和荧光探针序列，在适合的PCR条件下可在一个反应管中同时检测katG基因315位和inhA基因-15位的突变情况。本发明方法可以简便快速地在临床样品中检测结核分枝杆菌异烟肼耐药基因突变，可应用于结核分枝杆菌的分子耐药诊断。

主权项

一种结核分枝杆菌异烟肼耐药基因突变的检测方法，其特征在于具体步骤包括：通过扩增反应，扩增结核分子杆菌基因组序列，其中，所述基因组的区域中的突变引起了结核分枝杆菌的异烟肼耐药；所述扩增反应的扩增体系包括2条标记的寡核苷酸探针，2对扩增引物和一个热稳定的DNA聚合酶；所述标记的寡核苷酸探针与扩增的基因组序列杂交，产生可判读的扩增曲线图；所述标记的寡核苷酸探针与靶核苷酸序列杂交区至少包含一个异烟肼基因突变位点，而且所述标记的寡核苷酸探针与野生型靶核苷酸互补；所述寡核苷酸探针是双标记探针，包括一个报告标记荧光基团和一个淬灭标记基团。