[发明专利]一种构建T载体的方法无效
| 申请号： | 201110177458.0 | 申请日： | 2011-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN102286515A | 公开（公告）日： | 2011-12-21 |
| 发明（设计）人： | 周江宁;方辉;赵君 | 申请（专利权）人： | 中国科学技术大学 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;C12N15/63 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 逯长明 |
| 地址： | 230026*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种构建T载体的方法，为将两端含有特异限制性内切酶识别序列的抗性基因定向克隆到出发载体的两个多克隆位点之间，用上述抗性基因对应的抗生素筛选阳性克隆，得到T载体前体；然后用所述特异限制性内切酶消化所得T载体前体，回收大片段，得到T载体；其中，所述特异限制性内切酶为其识别序列被酶切后突出末端位点可以是T的限制性内切酶，所述抗性基因与出发载体所含抗性基因不同。本发明所述构建T载体的方法简单高效，在制备过程中利用引入的抗性基因片段来控制T载体的质量。利用此方法所获得的T载体不仅保留有出发载体的优点，而且还具有质量稳定、自身环化率低、克隆效果高等特点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 构建 载体 方法 | ||
【主权项】：
一种构建T载体的方法，其特征在于，包括：步骤1、将两端含有特异限制性内切酶识别序列的抗性基因定向克隆到出发载体的两个多克隆位点之间，用上述抗性基因对应的抗生素筛选阳性克隆，得到T载体前体；步骤2、用步骤1所述特异限制性内切酶识别序列对应的特异限制性内切酶消化步骤1所得T载体前体，回收大片段，得到T载体；其中，所述特异限制性内切酶为其识别序列被酶切后突出末端位点可以是T的限制性内切酶，步骤1所述抗性基因与出发载体所含抗性基因不同。
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