[发明专利]一种检测宫颈癌血浆Bmi-1 mRNA的专用试剂盒及方法有效
| 申请号： | 201110167829.7 | 申请日： | 2011-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN102230014A | 公开（公告）日： | 2011-11-02 |
| 发明（设计）人： | 王传新;张欣 | 申请（专利权）人： | 山东大学齐鲁医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 杨琪 |
| 地址： | 250014 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测宫颈癌血浆Bmi-1 mRNA的专用试剂盒，具有结果稳定、分析可靠等优点，包括Bmi-1基因、GAPDH基因和EEF1A1基因的mRNA的引物，如SEQUENCE LISTING所示。本发明还公开了一种检测宫颈癌血浆Bmi-1 mRNA表达量的方法，具有操作简便易行等优点，步骤如下：(1)提取样本血浆的总RNA；(2)RT-PCR扩增；(3)制作标准曲线，计算斜率slope，根据公式E＝10(-1/slope)-1，计算扩增效率E；(4)计算：选中样本和校对样本检测孔，应用实时荧光定量PCR仪的随机软件得出样本阈值和校对样本阈值，根据公式Q＝(E+1)-ΔCq，得出基因的校正起始拷贝数Q；将样本目的基因的Q值与内参基因的Q值的几何平均数相比，得到目的基因Bmi-1的相对表达量。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 宫颈癌 血浆 bmi mrna 专用 试剂盒 方法 | ||
【主权项】：
一种检测宫颈癌血浆Bmi‑1 mRNA的专用试剂盒，其特征在于：包括Bmi‑1基因、GAPDH基因和EEF1A1基因的mRNA的引物，引物序列如下所示：Bmi‑1‑F：5’‑GAGCGTACTACATTGATGTCACAAC‑3’；Bmi‑1‑R：5’‑GCTGGTCTCCAGGTCGCGAACAATA‑3’；GAPDH‑F：5’‑TGCACCACGAACTGCTTAGC‑3’；GAPDH‑R：5’‑GGCATGGACTGTTATCATGAG‑3’；EEF1A1‑F：5’‑CTGGCAAGTCCACCAAGTCT‑3’；EEF1A1‑R：5’‑CCGTTCTTCACCCACTGATT‑3’。
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