[发明专利]人脐带间充质干细胞表达人2.5Sβ-神经生长因子及分离纯化的方法有效
申请号: | 201110116404.3 | 申请日: | 2011-05-06 |
公开(公告)号: | CN102220338A | 公开(公告)日: | 2011-10-19 |
发明(设计)人: | 杨国成;夏腊菊;周波;杨媛 | 申请(专利权)人: | 武汉北度生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/85;C07K14/48;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18 |
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地址: | 430000 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明涉及一种STEMPRO MSC SFM无血清Cytoline1微载体培养技术,培养人脐带间充质干细胞(HUMSC)表达重组人2.5SβNGF和分离纯化人2.5SβNGF的新方法。该方法采HUMSC表达系统表达2.5S-βNGF,采用等电点沉淀、CM-SepharosFF和SP-SepharoeHP层析三步联用法分离纯化。该方法与从小鼠颌下腺提取NGF或大肠杆菌表达系统表达NGF利用亲和层析、离子交换层析和疏水层析技术分离相比,具有生产规模大、产品纯度高、产品生物活性高和收率高、可避免异源性蛋白的污染等优点。 | ||
搜索关键词: | 脐带 间充质 干细胞 表达 2.5 神经 生长因子 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】:
人脐带间充质干细胞表达人2.5Sβ‑神经生长因子及分离纯化的方法,包括如下步骤:1)、HUMSC原代细胞的分离与培养;2)、STEMPRO MSC SFM无血清Cytoline 1微载体培养技术传代培养;3)、细胞冻存;4)、2.5Sβ‑NGF克隆、诱导分化与扩增;5)、HUMSC的Cytoline 1微载体扩增;7)、2.5Sβ‑NGF的分离纯化。
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