[发明专利]一种重组大肠杆菌及应用其以单一碳源生产PHBV的方法有效
| 申请号： | 201110079896.3 | 申请日： | 2011-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN102212501A | 公开（公告）日： | 2011-10-12 |
| 发明（设计）人： | 祁庆生;陈泉;王倩;魏国清 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P7/62;C12R1/19 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 李健康 |
| 地址： | 250100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组大肠杆菌QW103PT及其在利用单一碳源生产聚3-羟基丁酸酯-co-3-羟基戊酸酯(PHBV)中的应用，本发明的重组大肠杆菌能够高效利用单一碳源合成PHBV，与重组菌DH5α(pBHR68)相比，其3HV的摩尔分数由0.45％提高到17.5％，对PHBV的商业生产具有显著的意义。本发明解决了丙酸作为辅助碳源成本过高及生产过程中控制策略过于复杂的问题，开创了利用简单碳源合成PHBV的新思路。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 大肠杆菌 应用 单一 碳源 生产 phbv 方法 | ||
【主权项】：
一种产聚3‑羟基丁酸酯‑co‑3‑羟基戊酸酯(PHBV)的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌名为重组大肠杆菌QW103PT，由如下方法制得，即：以基因工程技术敲除大肠杆菌中的prpC基因，得到大肠杆菌QW100；再在菌株QW100中敲除scpC基因得到大肠杆菌QW102；再进一步在菌株QW102中敲除pta基因，获得基因型为E.coliΔprpCΔscpCΔpta的大肠杆菌QW103；然后将来源于大肠杆菌MG1655的已将thrA基因1034位的C碱基突变为T碱基的thrABC基因簇插入到载体pCL1920中，获得thrABC基因表达载体pCL‑thrABC，将来源于真养产碱杆菌(Alcaligenes eutropha)中的phbCAB基因簇以及来源于谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)中的ilvA基因依次插入到载体pBluescript SK‑中，获得PHBV合成酶和苏氨酸脱氨酶双表达载体pHB‑ilvA；最后将获得表达载体pCL‑thrABC和pHB‑ilvA分别转化进入大肠杆菌QW103中，得到产聚3‑羟基丁酸酯‑co‑3‑羟基戊酸酯(PHBV)的重组大肠杆菌菌株QW103PT。
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