[发明专利]CD8α-白介素21-CD137复合物扩增激活淋巴细胞的方法有效
| 申请号： | 201110075736.1 | 申请日： | 2011-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN102154207A | 公开（公告）日： | 2011-08-17 |
| 发明（设计）人： | 吴忠福;徐以兵;董生聚 | 申请（专利权）人： | 浙江中赢干细胞生物工程股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;C12N5/0781 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 310052 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种免疫学领域，具体是指使用CD8α-白介素21-CD137复合物经作用扩增、激活自然杀伤细胞(NK)成为淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)细胞。本发明通过将CD8α、白介素21和CD137功能的多肽形成CD8α-白介素21-CD137复合物，然后外源表达载体进入宿主K562细胞后，激活启动子，培养细胞后即得到表达跨膜白介素21-CD137复合物的细胞；再把复合物经常规纯化后的复合物用来扩增激活淋巴细胞生成LAK细胞。本发明的优点是：通过跨膜白介素21-CD137复合物和低剂量白介素2培养扩增的LAK提高病人的免疫力来帮助病人抵抗肿瘤，抵抗病毒和细菌。本发明在临床具有广泛的使用前景。 | ||
| 搜索关键词： | cd8 白介素 21 cd137 复合物 扩增 激活 淋巴细胞 方法 | ||
【主权项】：
CD8α‑白介素21‑CD137复合物扩增激活淋巴细胞的方法，其特征在于：(1)CD8α、白介素21和CD137是上述各蛋白质的全部多肽或是包括上述各蛋白质中具备功能的多肽成分；(2)CD8α‑白介素21‑CD137复合物采用蛋白稳定表达系统，其中细胞系转录了稳定表达CD8α‑白介素21‑CD137复合物的表达载体，载体中含有病毒启动子和选择标记基因；(3)外源表达载体进入宿主K562细胞后，激活启动子，培养细胞后即得到表达跨膜白介素21‑CD137复合物的细胞；宿主K562细胞经过酸、碱或辐照后即得到用来扩增淋巴细胞的跨膜白介素21‑CD137复合物；(4)把跨膜白介素21‑CD137复合物依次用：硫酸铵或乙醇沉淀，酸提取，阴离子或阳离子交换色谱，疏水作用层析，亲和层析，羟基磷灰石色谱法，色谱法和凝集素进行纯化，即得纯化复合物；纯化复合物用来扩增激活淋巴细胞生成LAK细胞。
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