[发明专利]一种凋落物总DNA的提取方法无效
| 申请号： | 201110062434.0 | 申请日： | 2011-03-15 |
| 公开（公告）号： | CN102676496A | 公开（公告）日： | 2012-09-19 |
| 发明（设计）人： | 隋心;韩士杰;冯富娟 | 申请（专利权）人： | 中国科学院沈阳应用生态研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 许宗富;周秀梅 |
| 地址： | 110164 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明涉及凋落物分子生物学，具体的说是一种凋落物总DNA的提取方法。将已研成粉末、预冷的凋落物加入于CTAB提取缓冲液中混匀，于64-66℃水浴5-10min；而后以12000-13000r·min-1离心5-10min，收集沉淀，待用；将步骤1)所得沉淀加入到过量的CTAB提取缓冲液混匀，64-66℃水浴5-10min，待用；将步骤2)水浴后沉淀抽提2-4次，抽提过程为将沉淀加入等量的氯仿-异戊醇中混匀，以12000-13000r·min-1离心5-10min，收集上清液；将步骤3)抽提后上清液中加入上清液2-2.5体积的预冷无水乙醇和上清液0.2-0.3倍体积的NaAC混匀，静止放置15-30min，而后以10000-12000r·min-1离心5-10min，所得沉淀，即为凋落物总DNA。本发明提取方法与传统的CTAB法相比，提取效果比较好，时间短，容易操作。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 凋落 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种凋落物总DNA的提取方法，其特征在于：1)将已研成粉末、预冷的凋落物加入于CTAB提取缓冲液中混匀，于64‑66℃水浴5‑10min；而后以12000‑13000r·min‑1离心5‑10min，收集沉淀，待用；2)将步骤1)所得沉淀加入到过量的CTAB提取缓冲液混匀，64‑66℃水浴5‑10min，待用；3)将步骤2)水浴后沉淀抽提2‑4次，抽提过程为将沉淀加入等量的氯仿‑异戊醇中混匀，以12000‑13000r·min‑1离心5‑10min，收集上清液；4)将步骤3)抽提后上清液中加入上清液2‑2.5体积的预冷无水乙醇和上清液0.2‑0.3倍体积的NaAC混匀，静止放置15‑30min，而后以10000‑12000r·min‑1离心5‑10min，所得沉淀，即为凋落物总DNA。
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