[发明专利]一种凋落物总DNA的提取方法无效
| 申请号： | 201110062434.0 | 申请日： | 2011-03-15 |
| 公开（公告）号： | CN102676496A | 公开（公告）日： | 2012-09-19 |
| 发明（设计）人： | 隋心;韩士杰;冯富娟 | 申请（专利权）人： | 中国科学院沈阳应用生态研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 许宗富;周秀梅 |
| 地址： | 110164 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 凋落 dna 提取 方法 | ||
1.一种凋落物总DNA的提取方法，其特征在于：
1)将已研成粉末、预冷的凋落物加入于CTAB提取缓冲液中混匀，于64-66℃水浴5-10min；而后以12000-13000r·min-1离心5-10min，收集沉淀，待用；
2)将步骤1)所得沉淀加入到过量的CTAB提取缓冲液混匀，64-66℃水浴5-10min，待用；
3)将步骤2)水浴后沉淀抽提2-4次，抽提过程为将沉淀加入等量的氯仿-异戊醇中混匀，以12000-13000r·min-1离心5-10min，收集上清液；
4)将步骤3)抽提后上清液中加入上清液2-2.5体积的预冷无水乙醇和上清液0.2-0.3倍体积的NaAC混匀，静止放置15-30min，而后以10000-12000r·min-1离心5-10min，所得沉淀，即为凋落物总DNA。
2.按权利要求1所述的凋落物总DNA的提取方法，其特征在于：所述步骤4)所得凋落物总DNA采用70％乙醇洗涤而后室温干燥，将干燥DNA沉淀溶于去离子水中保存。
3.按权利要求1所述的凋落物总DNA的提取方法，其特征在于：所述步骤1)凋落物于-40℃或-20℃冰箱冷冻，而后将其于液氮中研成粉末。
4.按权利要求1所述的凋落物总DNA的提取方法，其特征在于：所述步骤1)和2)水浴时每隔2分钟颠倒混匀缓冲液。
5.按权利要求1所述的凋落物总DNA的提取方法，其特征在于：所述步骤3)中氯仿-异戊醇，按体积比为24∶1混匀。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院沈阳应用生态研究所，未经中国科学院沈阳应用生态研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201110062434.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
