[发明专利]一种小鼠表皮总蛋白的提取方法无效
申请号: | 201110009011.2 | 申请日: | 2011-01-17 |
公开(公告)号: | CN102146119A | 公开(公告)日: | 2011-08-10 |
发明(设计)人: | 苑存忠;孔北华;杨其峰;闫实;刘晓燕;杨宁 | 申请(专利权)人: | 山东大学齐鲁医院 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 杨琪 |
地址: | 250014 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种小鼠表皮总蛋白的提取方法,步骤如下:(1)取已被处死的小鼠,对其皮肤剃毛,并用70~80%乙醇浸泡的棉球手术法擦拭干净;(2)将皮肤剪下,用两片载玻片夹住,放在加热台上,热击处理;(3)加热后,立即用眼科镊迅速地将表皮撕下,放入蛋白裂解液中;(4)超声处理,然后在室温下放置0.5~2小时;(5)离心,取上清;(6)再次离心,取上清,即得小鼠表皮总蛋白,将所得上清液进行纯化或-80℃分装冻存。本发明将热击法分离小鼠表皮和总蛋白提取方法结合起来,操作简单快速,经济适用,分离的小鼠表皮量大、无真皮细胞组织搀杂,提取的总蛋白质量好、纯度高,可以满足许多分子生物学实验的需要。 | ||
搜索关键词: | 一种 小鼠 表皮 蛋白 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种小鼠表皮总蛋白的提取方法,其特征在于,步骤如下:(1)取已被处死的小鼠,对其皮肤剃毛,并用70~80%乙醇浸泡的棉球手术法擦拭干净;(2)将皮肤剪下,放在加热台上,热击处理;(3)加热后,立即将表皮撕下,放入蛋白裂解液中;(4)超声处理,然后在室温下放置0.5~2小时;(5)离心,≥18000g,4℃,0.5~2小时,取上清;(6)再次离心,≥18000g,4℃,0.5~2小时,取上清,即得小鼠表皮总蛋白,将所得上清液进行纯化或‑80℃分装冻存。
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