[发明专利]一种小鼠表皮总蛋白的提取方法无效
| 申请号： | 201110009011.2 | 申请日： | 2011-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN102146119A | 公开（公告）日： | 2011-08-10 |
| 发明（设计）人： | 苑存忠;孔北华;杨其峰;闫实;刘晓燕;杨宁 | 申请（专利权）人： | 山东大学齐鲁医院 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 杨琪 |
| 地址： | 250014 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 小鼠 表皮 蛋白 提取 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种小鼠表皮总蛋白的提取方法，其特征在于，步骤如下：
(1)取已被处死的小鼠，对其皮肤剃毛，并用70～80％乙醇浸泡的棉球手术法擦拭干净；
(2)将皮肤剪下，放在加热台上，热击处理；
(3)加热后，立即将表皮撕下，放入蛋白裂解液中；
(4)超声处理，然后在室温下放置0.5～2小时；
(5)离心，≥18000g，4℃，0.5～2小时，取上清；
(6)再次离心，≥18000g，4℃，0.5～2小时，取上清，即得小鼠表皮总蛋白，将所得上清液进行纯化或-80℃分装冻存。
2.根据权利要求1所述小鼠表皮总蛋白提取方法，其特征在于：所述步骤(2)中热击处理的参数为：60℃加热，1～3分钟。
3.根据权利要求1所述小鼠表皮总蛋白提取方法，其特征在于：所述步骤(3)中，蛋白裂解液的组成为：7M尿素；2M硫脲；4％CHAPS；65mM DTT；0.5％SDS；5mM乙酸镁。
4.根据权利要求1所述的一种小鼠表皮总蛋白的提取方法，其特征在于：所述步骤(4)中超声处理的参数为：6秒～6秒，1～3分钟。
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