[发明专利]结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的构建、表达和纯化方法及其应用有效
申请号: | 201010613320.6 | 申请日: | 2010-12-29 |
公开(公告)号: | CN102154324A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 祝秉东;牛红霞;胡丽娜;李青;王秉翔;达泽蛟;辛奇;万艳;马维民 | 申请(专利权)人: | 兰州大学 |
主分类号: | C12N15/31 | 分类号: | C12N15/31;C12N15/70;C07K19/00;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/16;A61K39/04;A61P31/06 |
代理公司: | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人: | 夏晏平 |
地址: | 730000 甘肃省兰*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明公开了结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的构建、表达和纯化方法及其应用,将Mtb10.4和Hsp16.3基因进行PCR扩增并依次插入到克隆载体的多克隆位点中,构建重组载体;然后在大肠杆菌中表达;最后进行纯化得到融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3,该融合蛋白可在结核亚单位疫苗中应用。本发明的优点在于:该融合蛋白疫苗可诱导动物较强的细胞和体液免疫反应;通过动物攻毒实验表明,该疫苗在BCG免疫基础上,具有加强免疫作用,可提高和延长BCG的保护效果;且该疫苗无明显毒副作用。 | ||
搜索关键词: | 结核 分枝杆菌 融合 蛋白 mtb10 hsp16 构建 表达 纯化 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4‑Hsp16.3的构建、表达和纯化方法,其特征在于:首先,将Mtb10.4和Hsp16.3基因进行PCR扩增并依次插入到克隆载体的多克隆位点中,构建重组载体;然后将上述重组载体在大肠杆菌中表达融合蛋白Mtb10.4‑Hsp16.3;最后根据融合蛋白Mtb10.4‑Hsp16.3的分子量、电荷和亲和力进行纯化,通过纯化得到融合蛋白Mtb10.4‑Hsp16.3。
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