[发明专利]荧光PCR法对食品中葡萄球菌肠毒素的快速检测与分型方法

摘要

本发明属于食品科学与技术中的微生物毒素的分子检测领域。具体涉及应用总DNA成分提取、SYBRGreen荧光定量PCR快速检测的流程对食品中11个血清型的葡萄球菌肠毒素进行快速检测与分型。结果表明，应用以上方法可根据35个PCR循环内是否出现显著扩增曲线从而对食品中的葡萄球菌肠毒素进行有效的分型，具有良好的针对不同血清型肠毒素基因的特异性，具备灵敏、准确、快捷、方便等特征，相比于已有方法大大提高了检测与分型的效率，为不同类型葡萄球菌肠毒素导致的食品污染风险分析提供了新的方法。

主权项

一种对食品中的葡萄球菌肠毒素进行同时快速检测与分型的SYBR Green荧光定量PCR方法，其特征是由以下步骤构成：（1）将金黄色葡萄球菌呈阳性的食品样本在无菌状态下粉碎、均质后，使用食品总DNA提取试剂盒进行食品中总DNA的提取与纯化；（2）分别根据11种葡萄球菌肠毒素血清型基因sea、seb、sec、sed、see、seg、seh、sei、ser、ses、set的特征序列设计用于SYBR Green荧光定量PCR的扩增引物，并针对上述提取的食品中总DNA，应用ABI 7500 FAST荧光定量PCR仪的快速模式进行这11种葡萄球菌肠毒素基因的检测与分型，通过荧光定量PCR仪的荧光检测器自动记录的荧光信号，根据35个PCR循环内是否出现显著扩增曲线从而对食品中的葡萄球菌肠毒素血清型进行有效的分型。