[发明专利]一种EV71病毒的化学发光免疫成像检测方法无效
| 申请号： | 201010542645.X | 申请日： | 2010-11-12 |
| 公开（公告）号： | CN102175858A | 公开（公告）日： | 2011-09-07 |
| 发明（设计）人： | 王汉中;何治柯;张万坡;陈璐;李海刚 | 申请（专利权）人： | 中国科学院武汉病毒研究所 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/543;C12N15/41;C12N15/63;C07K14/085;C07K16/10;C07K16/06 |
| 代理公司： | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 | 代理人： | 王守仁 |
| 地址： | 430071 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明是基于磁性微球分离和化学发光免疫成像的EV71病毒检测方法，该方法主要是：将EV71病毒兔抗多克隆抗体与磁性微球偶联；在微孔板中加入待检样品和磁性微球，使待检样品中的病毒与病毒多克隆抗体结合；再加入生物素化的EV71病毒VP1蛋白兔抗多克隆抗体，使其与待检样品特异性反应；加入SA-HRP，使其与生物素结合，最终形成磁性微球－多克隆抗体－病毒－多克隆抗体－HRP复合物；加入化学发光底物，检测化学发光强度。本发明中化学发光强度和待测病毒浓度成正比，可以得出化学发光强度和待测EV71病毒浓度之间的线性关系。本发明具有操作简便、灵敏度高和特异性强等优点，能更好地满足EV71病毒临床检测的需要。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 ev71 病毒 化学 发光 免疫 成像 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种EV71病毒的化学发光免疫成像检测方法，其特征是一种基于磁性微球分离和化学发光免疫成像的EV71病毒检测方法，该方法包含以下步骤：（1）在磁性微球的表面偶联EV71病毒的兔抗多克隆抗体；（2）将偶联有抗体的磁性微球加入检测样品，孵育后利用磁铁分离，去除上清，用PBSTB缓冲液洗涤；（3）加入生物素化的EV71 VP1重组蛋白的兔抗多克隆抗体，孵育后利用磁铁分离，去除上清，用PBSTB缓冲液洗涤；（4）加入SA‑HRP，孵育后利用磁铁分离，去除上清，用PBSTB缓冲液洗涤后转移微球至新的微孔板中；（5）加入HRP化学发光底物，把反应后待检测的磁性微球置放于凝胶成像仪中进行测量，考察化学发光强度的对数与待测样品抗体浓度的对数之间的线性关系；经过上述步骤，实现EV71病毒的化学发光免疫成像检测。
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