[发明专利]通过检测DNA浓度测定基质中食用菌菌丝生物量的方法

摘要

本发明涉及一种通过检测DNA浓度测定基质中食用菌菌丝生物量的方法，包括：(1)培养食用菌纯菌丝；(2)过滤菌丝，冲洗，冷冻并充分干燥；(3)梯度称取菌丝，提取DNA，构建关联标准曲线；(4)取相应基质，提取DNA，确定基质DNA本底水平；(5)取菌丝与基质混合，提取DNA，确定DNA量，与步骤(3)和(4)的结果比较，确定该种基质对DNA提取的影响；(6)取待测样品，提取DNA，确定DNA量，对照标准曲线、基质本底和基质影响，确定含有基质的样品中食用菌菌丝的生物量。本发明的方法简单，耗时短，高效、准确，一经检测系统确定可对相应培养模式或生长环境中的食用菌菌丝生物量进行长期、稳定的监测。

主权项

一种通过检测DNA浓度测定栽培基质中食用菌菌丝生物量的方法，包括下列步骤：(1)培养标准菌丝取待测食用菌斜面培养物，活化后打碎，接入新鲜的标准液体培养基中，摇床培养至菌丝稳定期；(2)菌丝处理过滤上述菌丝，无菌水冲洗，冷冻并充分干燥；(3)构建标准曲线将步骤(2)处理后的菌丝迅速研磨，梯度称取后置于容器中，用CTAB法提取DNA，NANODROP 1000紫外分光光度计确定DNA量，构建提取DNA量和提取用菌丝量的关联标准曲线；(4)相应基质DNA水平确定取相应基质，用CTAB法提取DNA，NANODROP 1000紫外分光光度计确定基质DNA本底水平；(5)培养菌丝与基质混合，确定相应基质对DNA提取的影响称取步骤(2)处理后的菌丝与上述基质混合，用CTAB法提取DNA，NANODROP 1000紫外分光光度计确定DNA量，与步骤(3)和(4)的结果比较，确定该种基质对DNA提取的影响；(6)待测样品中食用菌菌丝生物量的确定取待测样品，充分干燥，研磨，定量秤取后用CTAB法提取DNA，NANODROP 1000紫外分光光度计确定DNA量，对照标准曲线、基质本底和基质影响，确定含有基质的样品中食用菌菌丝的生物量。