[发明专利]一种乙型脑炎疫苗的生产方法有效
| 申请号： | 201010264218.X | 申请日： | 2010-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN102327609A | 公开（公告）日： | 2012-01-25 |
| 发明（设计）人： | 刘钿莲;刘丹;艾文 | 申请（专利权）人： | 丽珠集团疫苗工程股份有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/12 | 分类号： | A61K39/12;C12N7/04;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人： | 曹津燕 |
| 地址： | 519045 广东省珠海市金*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种乙型脑炎疫苗的生产方法，该生产方法包括以下步骤：将Vero种子细胞加入300升生物反应器中，与微载体一起进行灌流培养；灌流培养5～6天后，沉降微载体和细胞，以维持液替换培养基，接种乙型脑炎病毒继续进行灌流培养；收集病毒培养液，过滤、灭活并纯化。上述方法使得用于生产的细胞密度提高，大大提高了生产能力，实现大规模、高密度培养；消除了产品批次间差异和培养周期的不稳定性，保证产品的质量稳定均一，提高了产品质量；解决了生物反应器放大培养工艺的难题，实现了生物反应器高密度、大规模培养哺乳动物细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脑炎 疫苗 生产 方法 | ||
【主权项】：
一种乙型脑炎疫苗的生产方法，该生产方法包括以下步骤：(1)将Vero种子细胞加入300升生物反应器中，与微载体一起进行灌流培养，其中培养基包含9.55g/L的M199培养基、2.2g/L的NaHCO3、1.5g/L的葡萄糖、0.2g/L的谷氨酰胺以及10％(体积/体积)的胎牛血清；培养条件包括：搅拌速度为35～40转/分，pH为7.2～7.4，溶解氧为40～50％饱和度，温度为36.5～37.5℃，培养基的灌流速度为315升/天；(2)灌流培养5～6天后，沉降微载体和细胞，以维持液替换培养基，接种乙型脑炎病毒继续进行灌流培养，其中维持液包含9.55g/L的M199培养基，2.2g/L的NaHCO3，1.0g/L的蔗糖以及0.1g/L的人血白蛋白；培养条件包括：搅拌速度为35～40转/分，pH为7.5～7.6，溶解氧为40‑50％饱和度，温度为33.5‑34.5℃，维持液的灌流速度为315升/天；(3)收集病毒培养液，过滤、灭活并纯化。
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