[发明专利]一种采用DNA为探针的电化学检测环境污染物方法

摘要

一种采用DNA为探针的电化学检测环境污染物方法，所述的生物传感器检测装置包括工作电极、辅助电极、参比电极、检测池和电化学工作站；工作电极表面修饰核酸探针，在缓冲体系中检测环境样品中的基因毒性化合物。当检测结果为阳性时，传感器的信号变化明显。与现有的生物传感器相比，该方法主要优点是：1.灵敏度高，电活性信号分子与核酸探针结合，增大了响应电流；2.仪器设备小型廉价，检测通量大，样品前处理简单，适合现场快速筛查检测。此方法不但可以对已知基因毒性化合物进行筛查检测，而且可以评价新合成化合物的潜在毒性效应；筛查实际样品中是否含有基因毒性化合物。

主权项

一种采用双链DNA为检测探针的电化学检测环境污染物的方法，采用三电极体系的电化学装置进行检测，特征在于，该方法包括以下步骤：a).将单链DNA捕获探针的一端固定在电化学装置的工作电极表面，得到核酸捕获探针，采用封闭剂与工作电极表面的剩余位点结合；b).在杂交条件下，将互补靶DNA片段与上述的核酸捕获探针杂合，得到双链DNA修饰的工作电极探针；c).采用与双链DNA特异性结合的电活性信号分子溶液浸泡双链DNA修饰的工作电极探针，得到核酸传感器；将核酸传感器、参比电极和辅助电极置于检测缓冲体系中，进行电化学扫描并记录得到的电化学信号Ia；d).取出核酸传感器，将液态的目标分析物滴加到核酸传感器表面，静置10～30分钟，缓冲溶液淋洗，得到处理后的核酸修饰传感器；然后将处理后的核酸修饰传感器重新浸入到上述检测缓冲体系，进行电化学扫描并记录响应信号Ib；e).通过电流下降百分比(Ia‑Ib)/Ia是否≥8％，对基因毒性化合物进行筛选检测分析；通过与标准化合物(六氯苯)的电流下降百分比对比，对目标分析物进行毒性效应评价；通过核酸传感器电化学分析检测确定实际样品中是否含有目标分析物；所述的未知化合物通过核酸传感器检测的电流下降百分比，来评价未知化合物的基因毒性效应。