[发明专利]利用单抗检测莱克多巴胺残留的间接化学发光酶联免疫试剂盒

摘要

一种利用单抗检测莱克多巴胺残留的间接化学发光酶联免疫试剂盒。包括各孔包被有以莱克多巴胺与牛血清蛋白偶合制成的包被抗原的酶标板以及莱克多巴胺系列标准溶液、酶标羊抗鼠抗体溶液、莱克多巴胺抗体溶液、发光溶液、洗涤溶液、包被溶液及封闭溶液。本发明的化学发光酶联免疫检测试剂盒利用单克隆抗体进行化学发光酶联免疫检测，IC50＝0.6ng/ml。在鸡肉样品中最低检测限为0.10ng/ml，批间批内变异系数＜13％，回收率为88～114％。本发明应用单克隆抗体并将化学发光与间接酶联免疫法结合，建立了一种检测莱克多巴胺残留的新的体系，具有比普通的ELISA更高的灵敏度和特异性，能够在动物性食品(如奶、动物组织、尿样)中的莱克多巴胺残留检测中发挥重要作用。

主权项

一种利用单抗检测莱克多巴胺残留的间接化学发光酶联免疫试剂盒，其特征是该试剂盒由下列试剂组成：A.各孔包被有包被抗原即莱克多巴胺与载体蛋白的偶联物的酶标板1块；B.莱克多巴胺标准溶液：浓度分别为0.01ng/mL、0.05ng/mL、0.1ng/mL、0.2ng/mL、0.5ng/mL、0.8ng/mL、1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL各一瓶；C.酶标羊抗鼠抗体溶液：辣根过氧化酶‑羊抗鼠IgG原液，使用时用洗涤溶液配制成1∶2000的工作浓度；D.莱克多巴胺抗体溶液：人工免疫抗原免疫动物制得的单克隆抗体，使用时用洗涤溶液稀释成1∶8000的工作浓度；E.发光溶液：0.01M鲁米诺、pH＝8.8的0.001M对甲苯酚的三(羟甲基)氨基甲烷溶液和体积比3/10000的H2O2的混合液；F.洗涤溶液：指含有吐温‑20体积分数0.05％的pH＝7.5、0.1mol/L的磷酸盐缓冲液；G.包被溶液：1.59g碳酸钠和2.53g碳酸氢钠溶于1L水中，调节pH为9.5；H.封闭溶液：由10g OVA溶于1L洗涤溶液中，再加入质量比为0.05％的NaN3配制而成。