[发明专利]一种泥蚶线粒体COI基因扩增引物的筛选方法无效
| 申请号： | 201010254700.5 | 申请日： | 2010-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN101942432A | 公开（公告）日： | 2011-01-12 |
| 发明（设计）人： | 倪刚;李琪;孔令锋 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明筛选了一对用于泥蚶线粒体COI序列扩增的引物，其方法是利用美国国立生物技术信息中心上已有的泥蚶线粒体COI序列，下载后用BioEdit软件比对分析，在确定的保守区域后用引物设计软件Primer Premier 5设计多对引物。用泥蚶个体的DNA分别和合成的多对引物在反应体系下进行PCR反应，最后经琼脂糖凝胶电泳检测，筛选出一对引物COINF和COINR。经实验证明，该对引物具有条带单一、扩增效率大于90％的优点，能够满足泥蚶遗传多样性研究的需要，对泥蚶的资源保护和利用、多样性评估、遗传育种等方面将起到重要作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 线粒体 coi 基因 扩增 引物 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种泥蚶线粒体COI基因扩增引物的筛选方法，其特征是a、登陆美国国立生物技术信息中心，下载已有的泥蚶线粒体COI序列；b、将下载的序列用BioEdit软件比对分析，确定序列两端保守区域；c、在确定的保守区域用引物设计软件Primer Premier 5设计多对引物，送交上海生工生物技术有限公司合成；d、将泥蚶个体提取DNA，然后分别和合成的多对引物在反应体系下进行PCR反应，检测引物的扩增情况；e、进行琼脂糖凝胶电泳检测，筛选出条带单一、扩增效率高的一对引物COINF和COINR：COINF为5’TTGATAGGGATCTGTTTAAGA 3’；COINR为5’GCCAATACAGGCAAAGAAA 3’。
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