[发明专利]能同时降解果酒中苹果酸和柠檬酸菌株的筛选方法及应用无效
| 申请号: | 201010202066.0 | 申请日: | 2010-06-18 |
| 公开(公告)号: | CN101870955A | 公开(公告)日: | 2010-10-27 |
| 发明(设计)人: | 文连奎;王立芳;王治国;王贵珍 | 申请(专利权)人: | 吉林农业大学 |
| 主分类号: | C12N1/16 | 分类号: | C12N1/16;C12G3/08;C12R1/645 |
| 代理公司: | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人: | 王薇 |
| 地址: | 130118 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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| 摘要: | 本发明涉及一种能同时降解果酒中苹果酸和柠檬酸菌株的筛选方法及应用,其特征在于:具体的筛选方法如下:采集葡萄园土壤2g定量加到盛有100mL无菌生理盐水的三角瓶中,并加入8~12粒无菌玻璃珠,充分振荡后静置,取上清液再分别加入到以浓度为2g/L的苹果酸为唯一碳源的液体富集培养基中进行富集培养,培养条件为28℃,150r/min,摇床振荡培养,以24h为一个周期,每个周期结束后,按照以上的操作,依次将所培养的菌液转接入新鲜的富集培养基中,同时苹果酸浓度由2g/L、4g/L、6g/L、8g/L逐渐递增到10g/L;再通过初筛和复筛后选出对苹果酸具有较好降酸效果的菌株;具有较高的降酸率,并且能够耐受较高浓度的SO2,发酵温度适宜。且降解率达80%以上,并且该菌株耐受SO2浓度达450mg/L,最适培养温度为30℃,发酵温度适中。 | ||
| 搜索关键词: | 同时 降解 果酒 苹果酸 柠檬酸 菌株 筛选 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种能同时降解果酒中苹果酸和柠檬酸菌株的筛选方法,其特征在于:降解果酒中苹果酸和柠檬酸的有效菌为伊萨酵母属(Issatchenkia)的陆生伊萨酵母(Issatchenkia terricola)种,具体的筛选方法如下:采集葡萄园土壤2g定量加到盛有100mL无菌生理盐水的三角瓶中,并加入8~12粒无菌玻璃珠,充分振荡后静置,取上清液再分别加入到以浓度为2g/L的苹果酸为唯一碳源的液体富集培养基中进行富集培养,培养条件为28℃,150r/min,摇床振荡培养,以24h为一个周期,每个周期结束后,按照以上的操作,依次将所培养的菌液转接入新鲜的富集培养基中,同时苹果酸浓度由2g/L、4g/L、6g/L、8g/L逐渐递增到10g/L;再通过初筛和复筛后选出对苹果酸具有较好降酸效果的菌株;将筛选得到的降酸菌——陆生伊萨酵母用平板划线法进行多次分离纯化后,挑取单菌落接入到YPD斜面培养基上于28℃培养24h后4℃保存。
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