[发明专利]用于检测弓形虫的环介导等温扩增反应引物

摘要

本发明提供了两套用于检测弓形虫的环介导等温扩增反应引物，其是根据弓形虫RH株的保守基因，AF146527基因(序列如Seq ID No.1所示)设计的两套引物，包括与弓形虫AF146527重复区基因结合的内侧引物对和与弓形虫AF146527重复区基因结合的外侧引物对。采用本发明提供的引物进行弓形虫检测，特异性和灵敏度高，可检测出100fg的弓形虫DNA；与PCR检测方法相比，本发明提供的环介导等温扩增检测方法，不需要昂贵的PCR仪，只需普通的金属或水浴锅即可；检测结果使用荧光染料即可判定，操作简单方便；本发明的引物可应用于基层现场进行的临床医学检测，特别适于基层临床医学检测工作及现场即时检测。

主权项

一种用于检测弓形虫的环介导等温扩增反应引物，包括与弓形虫AF146527重复区基因结合的内侧引物对和与弓形虫AF146527重复区基因结合的外侧引物对，其特征在于，所述内侧引物对包括内侧上游引物FIP1：5′-CCGGTGTCTCTTTTTCCACCCTTCGGAGAGGGAGAAGATGTT-3′，内侧下游引物BIP1：5′-CCTCGTGGTGATGGCGGAGATCCCTTCGTCCAAGCCTC-3′；以及内侧上游引物FIP2：5′-CGGTGTCTCTTTTTCCACCCTTTTTTCGGAGAGGGAGAAGATGTTT-3′，内侧下游引物BIP2：5′-CTCGTGGTGATGGCGGAGATTTTCGTCCAAGCCTCCGACTCTG-3′；所述外侧引物对包括外侧上游引物F3：5′-GTTGGGAAGCGACGAGAG-3′，外侧下游引物：B3：5′-ACAGTGCATCTGGATTCCTC-3′；以及外侧上游引物F3′：5′-GTTGGGAAGCGACGAGAG-3′，外侧下游引物：B3′：5′-CAGTGCATCTGGATTCCT-3′。