[发明专利]用于检测弓形虫的环介导等温扩增反应引物无效

专利信息
申请号: 201010198530.3 申请日: 2010-06-04
公开(公告)号: CN101845505A 公开(公告)日: 2010-09-29
发明(设计)人: 索勋;孙希萌;贺光 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王朋飞;张庆敏
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 用于 检测 弓形虫 环介导 等温 扩增 反应 引物
【权利要求书】:

1.一种用于检测弓形虫的环介导等温扩增反应引物,包括与弓形虫AF146527重复区基因结合的内侧引物对和与弓形虫AF146527重复区基因结合的外侧引物对,其特征在于,所述内侧引物对包括内侧上游引物FIP1:5′-CCGGTGTCTCTTTTTCCACCCTTCGGAGAGGGAGAAGATGTT-3′,内侧下游引物BIP1:5′-CCTCGTGGTGATGGCGGAGATCCCTTCGTCCAAGCCTC-3′;以及内侧上游引物FIP2:5′-CGGTGTCTCTTTTTCCACCCTTTTTTCGGAGAGGGAGAAGATGTTT-3′,内侧下游引物BIP2:5′-CTCGTGGTGATGGCGGAGATTTTCGTCCAAGCCTCCGACTCTG-3′;所述外侧引物对包括外侧上游引物F3:5′-GTTGGGAAGCGACGAGAG-3′,外侧下游引物:B3:5′-ACAGTGCATCTGGATTCCTC-3′;以及外侧上游引物F3′:5′-GTTGGGAAGCGACGAGAG-3′,外侧下游引物:B3′:5′-CAGTGCATCTGGATTCCT-3′。

2.权利要求1所述的引物在检测弓形虫中的应用。

3.一种检测弓形虫的方法,该方法包括:1)提取弓形虫DNA;2)利用权利要求1所述的内侧引物对和外侧引物对进行环介导等温扩增反应;3)结果检测。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述环介导等温扩增反应体系如下:

5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于,所述环介导等温扩增反应的条件为:60-65℃,20-90分钟。

6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述结果检测的方法包括琼脂糖凝胶电泳法或显色法。

7.含有权利要求1所述用于检测弓形虫的环介导等温扩增反应引物的试剂盒。

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