[发明专利]用于检测弓形虫的环介导等温扩增反应引物无效
申请号: | 201010198530.3 | 申请日: | 2010-06-04 |
公开(公告)号: | CN101845505A | 公开(公告)日: | 2010-09-29 |
发明(设计)人: | 索勋;孙希萌;贺光 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞;张庆敏 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 弓形虫 环介导 等温 扩增 反应 引物 | ||
1.一种用于检测弓形虫的环介导等温扩增反应引物,包括与弓形虫AF146527重复区基因结合的内侧引物对和与弓形虫AF146527重复区基因结合的外侧引物对,其特征在于,所述内侧引物对包括内侧上游引物FIP1:5′-CCGGTGTCTCTTTTTCCACCCTTCGGAGAGGGAGAAGATGTT-3′,内侧下游引物BIP1:5′-CCTCGTGGTGATGGCGGAGATCCCTTCGTCCAAGCCTC-3′;以及内侧上游引物FIP2:5′-CGGTGTCTCTTTTTCCACCCTTTTTTCGGAGAGGGAGAAGATGTTT-3′,内侧下游引物BIP2:5′-CTCGTGGTGATGGCGGAGATTTTCGTCCAAGCCTCCGACTCTG-3′;所述外侧引物对包括外侧上游引物F3:5′-GTTGGGAAGCGACGAGAG-3′,外侧下游引物:B3:5′-ACAGTGCATCTGGATTCCTC-3′;以及外侧上游引物F3′:5′-GTTGGGAAGCGACGAGAG-3′,外侧下游引物:B3′:5′-CAGTGCATCTGGATTCCT-3′。
2.权利要求1所述的引物在检测弓形虫中的应用。
3.一种检测弓形虫的方法,该方法包括:1)提取弓形虫DNA;2)利用权利要求1所述的内侧引物对和外侧引物对进行环介导等温扩增反应;3)结果检测。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述环介导等温扩增反应体系如下:
5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于,所述环介导等温扩增反应的条件为:60-65℃,20-90分钟。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述结果检测的方法包括琼脂糖凝胶电泳法或显色法。
7.含有权利要求1所述用于检测弓形虫的环介导等温扩增反应引物的试剂盒。
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