[发明专利]一种小鼠巨噬细胞的Giemsa染色方法无效

专利信息
申请号: 201010187760.X 申请日: 2010-06-01
公开(公告)号: CN101825533A 公开(公告)日: 2010-09-08
发明(设计)人: 吴淑燕;储元元;黄瑞 申请(专利权)人: 苏州大学
主分类号: G01N1/30 分类号: G01N1/30
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 楼高潮
地址: 215163 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种小鼠巨噬细胞的Giemsa染色方法,包括以下实施步骤:1)细胞培养;2)细胞预处理;3)Giemsa染色;Giemsa染色的最适条件为小圆玻片用前处理烘干后,甲醇固定3min,过滤的中性染液(pH7.0~7.4)染色3min,1×PBS缓冲液洗涤。利用本发明的Giemsa染色方法可以明显的区分出被染色后的细胞核和细胞质。
搜索关键词: 一种 小鼠 巨噬细胞 giemsa 染色 方法
【主权项】:
一种小鼠巨噬细胞的Giemsa染色方法,包括以下实施步骤:1)细胞培养;将小鼠巨噬细胞用含10%FBS的RPMI培养基于37℃、5%CO2的条件下培养,隔日传代;2)细胞预处理;将培养至对数生长期的小鼠巨噬细胞用胰酶消化后,于含10%FBS的RPMI培养基中以1500r/min的转速离心5min后洗涤2次,将细胞浓度调整为1×105个/ml,加入铺有小圆玻片的24孔板中,每孔1ml,在37℃、5%CO2的条件下平衡12h待用;3)Giemsa染色;其特征在于:所述Giemsa染色的过程如下:取出平衡12h后的小圆玻片,烘干,甲醇固定3min,将Giemsa染液PH值调制到7.0-7.4之间并过滤,过滤后的Giemsa染液对小圆玻片上的小鼠巨噬细胞进行染色,染色3min后用1×PBS缓冲液冲洗,用吸水纸吸干后油镜下观察并摄片。
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