[发明专利]钝齿棒杆菌N-乙酰谷氨酸激酶突变提高精氨酸产量的方法有效
| 申请号： | 201010166997.X | 申请日： | 2010-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN102021154A | 公开（公告）日： | 2011-04-20 |
| 发明（设计）人： | 许正宏;饶志明;徐美娟;张晓梅;许泓瑜;窦文芳 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/63;C12N1/21;C12P13/10;C12R1/15 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | L-精氨酸是人体内所需半必需碱性氨基酸之一，具有多种独特的生理和药理作用。高产精氨酸突变菌株C.crenatum SYPA5-5以循环途径合成精氨酸，乙酰谷氨酸激酶(NAGK)是其合成途径中关键酶，受到产物精氨酸的反馈抑制。利用重叠PCR技术用编码天冬氨酸的GAT密码子取代了编码NAGK蛋白中287位的甘氨酸的GGA密码子，突变后获得高活性且受精氨酸的反馈抑制作用明显降低的NAGK。将argBSD基因通过pJCl-tac引入高产精氨酸的钝齿棒杆菌中，进一步提高关键酶的表达量。最终产酸水平由原来的28g/L提高至36.3g/L，L-精氨酸产量提高了29.7％。 | ||
| 搜索关键词： | 钝齿棒 杆菌 乙酰 谷氨酸 激酶 突变 提高 精氨酸 产量 方法 | ||
【主权项】：
突变型N‑乙酰谷氨酸激酶，将含有如序列表中的SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的N‑乙酰谷氨酸激酶进行定点突变，其中野生型N‑乙酰谷氨酸激酶第287位的甘氨酸被天冬氨酸所取代，使得精氨酸的反馈抑制作用被减弱或解除。
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