[发明专利]适于PCR反应的快速提取食用菌基因组DNA的方法无效
| 申请号： | 201010162845.2 | 申请日： | 2010-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN101831422A | 公开（公告）日： | 2010-09-15 |
| 发明（设计）人： | 许峰;刘宇;王守现;赵爽;耿小丽;孟莉莉;王兰青;魏民 | 申请（专利权）人： | 北京市农林科学院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京瑞盟知识产权代理有限公司 11300 | 代理人： | 王明书 |
| 地址： | 100097 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种适于PCR反应的快速提取食用菌基因组DNA的方法，该方法包括：取材；研磨；加缓冲液振荡后水浴；加乙酸铵溶液后放置沉淀；离心后取上清液口加冰预冷异丙醇，混匀，放置沉淀；离心；洗涤沉淀，风干；溶解沉淀，保存等步骤。用本发明方法提取食用菌的基因组DNA时间短、速度快、操作简单、成本低、提取效率高，对环境无污染，提取的DNA质量稳定，适于PCR反应。 | ||
| 搜索关键词： | 适于 pcr 反应 快速 提取 食用菌 基因组 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种适于PCR反应的快速提取食用菌基因组DNA的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)取材：取菌丝体或子实体于离心管中；(2)加入少量石英砂或玻璃珠后，用研磨杵对菌丝体或子实体进行研磨至糊状；(3)加入抽提缓冲液，涡旋振荡1-3min；(4)水浴10-15min；(5)加入乙酸铵溶液，冰中放置8-10min；(6)离心：10,000-13,000r/min离心10-15min；(7)取上层水相至另一离心管中，加入冰预冷的异丙醇或无水乙醇，颠倒混匀，-20℃-4℃放置沉淀15-30min；(8)离心：10,000-13,000r/min离心10-13min；(9)弃上清，用70％乙醇洗涤沉淀，风干；(10)加入ddH2O和RNaseA溶液中，完全溶解沉淀，-20℃保存。
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