[发明专利]一种甲型流感病毒的恒温扩增检测试剂盒及其检测方法无效
| 申请号: | 201010145742.5 | 申请日: | 2010-04-13 |
| 公开(公告)号: | CN101864495A | 公开(公告)日: | 2010-10-20 |
| 发明(设计)人: | 方筠;叶魏;阎俊;张晓航;王健;张琳;周心;孟成艳;周娴;张琳;简大钊;贾哲甫;尤其敏;徐高连;石坚;钟华燕 | 申请(专利权)人: | 上海国际旅行卫生保健中心;杭州优思达生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达;谢文凯 |
| 地址: | 200135*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | 本发明涉及一种甲型流感病毒的恒温扩增检测试剂盒及其检测方法。本发明试剂盒包含RNA提取液、甲型流感病毒核酸恒温扩增反应液、甲型流感病毒阳性对照、阴性对照。本发明的检测试剂盒特异性高、灵敏度高;反应速度快,单个样本从样本处理到完成检测,仅需2小时;可同时满足高通量和低通量的样品检测,且整个反应过程不需要复杂的仪器。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 流感病毒 恒温 扩增 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】:
一种甲型流感病毒的恒温扩增检测试剂盒,其特征在于:包括下列组成:(1)RNA提取液:RNA提取试剂盒;(2)恒温扩增反应液:包括正向外围引物、反向外围引物、两条探针、两条交叉扩增引物、1×Thermolbuffer、MgSO4、dNTPs溶液、Bst DNA聚合酶和无菌双蒸水;其中:所述的外围引物分别为:正向外围引物序列为5’-TTCTAACCGAGGTCGAAACG-3’,SEQ ID NO1;反向外围引物序列为5’-ACAAAGCGTCTACGCTGCAG-3’,SEQ ID NO2;所述的两条探针的序列分别为:正向5’端Biotin标记探针5’-biotin-CATGGAATGGCTAAAGACAA-3’,SEQ IDNO3;反向3’端异硫氰酸荧光素FitC标记探针5’-CCTTAGTCAGAGGTGACAAG -FitC-3’,SEQ ID NO4;所述的扩增交叉引物分别为:扩增反向引物5’-CTATCATCCCGTCAGGCCCACAAAGCGTCTACGCTGCAG-3’,SEQ ID NO5;扩增正向引物5’-ACAAAGCGTCTACGCTGCAGCTATCATCCCGTCAGGCCC-3’,SEQ ID NO6;(3)阳性对照模板:为含有含有甲型流感HA基因片段的转录产物;(4)阴性对照:无菌双蒸水。
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