[发明专利]一种检测人工抗原制备成功与否的方法

摘要

本发明公开了一种检测人工抗原制备成功与否的方法，包括步骤：a)分别称取相同重量的人工抗原及载体蛋白，加1～10重量倍溶剂溶解，超声1min，12000rpm离心后，取上清液，分别得到人工抗原测试样品及载体蛋白测试样品；b)用超高效液相色谱四极杆电喷雾质谱联用仪分别对测试样品检测，分别得到超高效液相色谱图及四极杆电喷雾质谱图；c)比较所得人工抗原及载体蛋白的超高效液相色谱图及其相对应的质谱图的差异，确定人工抗原制备成功与否。本发明具有样品前处理简单，方法通用性强，对半抗原的物理化学特性无特别的要求，仪器操作条件简单，适合大规模的推广应用等优点。

主权项

一种检测人工抗原制备成功与否的方法，其特征在于该方法包括以下具体步骤：a、分别称取相同重量的人工抗原及载体蛋白，加1～10重量倍溶剂溶解，超声1min，12000rpm离心后，取上清液，分别得到人工抗原测试样品及载体蛋白测试样品；b、用超高效液相色谱四极杆电喷雾质谱联用仪分别对测试样品检测，分别得到其超高效液相色谱图及对应的四极杆电喷雾质谱图；c、比较所得人工抗原及载体蛋白的超高效液相色谱图及其相对应的质谱图的差异，确定人工抗原制备成功与否；其中：用超高效液相色谱四极杆电喷雾质谱联用仪对测试样品检测时，其超高效液相色谱条件为：流动相：A相：乙腈B相：体积比0.01∶100～0.1∶100的三氟乙酸水溶液线性梯度：在0～10min A相由10％～30％线性增加到70％～90％，相应的B相由70％～90％线性减少到30％～10％液相色谱柱为：ACQUITY UPLC C4，2.1mm×150mm，1，7um；其四极杆电喷雾质谱条件为：离子源：电喷雾离子源离子化方式：正离子离子化检测方式：全扫描；毛细管电压：2.5～3KV锥孔电压；20～35V扫描质量范围：m/z 1000～1600amu离子源温度：100～150℃去溶剂温度：250～300℃脱溶剂气：氮气脱溶剂气流速：400～700L/hr。