[发明专利]一种检测人工抗原制备成功与否的方法有效
| 申请号: | 201010145055.3 | 申请日: | 2010-04-12 | 
| 公开(公告)号: | CN101813679A | 公开(公告)日: | 2010-08-25 | 
| 发明(设计)人: | 张丽芳;薛飞群;李伟岭;裘敏琪 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院上海兽医研究所 | 
| 主分类号: | G01N30/36 | 分类号: | G01N30/36;G01N30/72 | 
| 代理公司: | 上海蓝迪专利事务所 31215 | 代理人: | 徐筱梅;张翔 | 
| 地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 人工 抗原 制备 成功 与否 方法 | ||
1.一种判断人工抗原是否制备出来的方法,其特征在于该方法包括以下具体步骤:
a、分别称取相同重量的人工抗原及载体蛋白,加1~10重量倍溶剂溶解,超声1min,12000rpm离心后,取上清液,分别得到人工抗原测试样品及载体蛋白测试样品;
b、用超高效液相色谱四极杆电喷雾质谱联用仪分别对测试样品检测,分别得到其超高效液相色谱图及对应的四极杆电喷雾质谱图;
c、比较所得人工抗原及载体蛋白的超高效液相色谱图及其相对应的质谱图的差异,确定人工抗原是否制备出来;
其中:用超高效液相色谱四极杆电喷雾质谱联用仪对测试样品检测时,其超高效液相色谱条件为:
流动相:
A相:乙腈
B相:体积比0.01∶100~0.1∶100的三氟乙酸水溶液
线性梯度:在0~10min A相 由10%~30%线性增加到70%~90%,相应的B相由70%~90%线性减少到30%~10%
液相色谱柱为:ACQUITY UPLC C4,2.1mm×150mm, 1.7um;
其四极杆电喷雾质谱条件为:
离子源:电喷雾离子源
离子化方式:正离子离子化
检测方式:全扫描;
毛细管电压:2.5~3KV
锥孔电压;20~35V
扫描质量范围:m/z 1000~1600 amu
离子源温度:100~150℃
去溶剂温度:250~300℃
脱溶剂气: 氮气
脱溶剂气流速:400~700L/hr;
所述溶剂为水或有机溶剂与水的混合物;有机溶剂为乙醇、甲醇、乙腈或丙酮;有机溶剂与水的体积比为1:1。
2.根据权利要求1 所述的方法,其特征在于所述载体蛋白为牛血清白蛋白。
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