[发明专利]一种含CpG ODN和poly I:C佐剂的喷鼻型流感病毒疫苗制备方法

摘要

本发明一种含CpG ODN和poly I:C佐剂的喷鼻型流感病毒疫苗制备方法，属于生物技术领域，其步骤为，采用鸡胚培养增殖流感病毒，经超滤浓缩、柱层析后获得纯化的流感病毒，经裂解后获得流感疫苗原液，将所需型别流感疫苗原液与CpG ODN佐剂、polyI:C佐剂配比后制备而成。本发明提供了一种可以降低流感病毒抗原用量，方便免疫接种的新型喷鼻型流感病毒疫苗制备方法，适宜于在全球大流感流行威胁下迅速提高流感疫苗供应能力。

主权项

一种含CpG ODN和poly I:C佐剂的喷鼻型流感病毒疫苗制备方法，其步骤是：(1)将H1N1、H3N2、B型流感病毒工作毒种分别接种于1000枚10日龄健康鸡胚尿囊腔增殖流感病毒；(2)收获流感病毒，用截留分子量100～750kD的超滤膜进行超滤浓缩；(3)将超滤浓缩后的流感病毒样品上样于充分平衡的Sepharose 4 FF柱，收集第一个洗脱峰为纯化的流感病毒；(4)经脱氧胆酸钠裂解的流感病毒样品，上样于Sepharose 6FF柱，纯化获得流感病毒疫苗原液；(5)将以上步骤分别得到的H1N1、H3N2、B型流感病毒疫苗原液混合；(6)按照每剂含H1N1流感病毒血凝素和H3N2流感病毒血凝素和B型流感病毒血凝素1～10微克、CpG ODN佐剂50～1000微克、poly I:C佐剂100～2000微克的配比，分装到喷鼻注射器即获得含CpG ODN和poly I:C佐剂的喷鼻型流感病毒疫苗。