[发明专利]一种含CpG ODN和poly I:C佐剂的喷鼻型流感病毒疫苗制备方法

权利要求书

1.一种含CpG ODN和poly I:C佐剂的喷鼻型流感病毒疫苗制备方法，其步骤是：

(1)将H1N1、H3N2、B型流感病毒工作毒种分别接种于1000枚10日龄健康鸡胚尿囊腔增殖流感病毒；

(2)收获流感病毒，用截留分子量100～750kD的超滤膜进行超滤浓缩；

(3)将超滤浓缩后的流感病毒样品上样于充分平衡的Sepharose 4 FF柱，收集第一个洗脱峰为纯化的流感病毒；

(4)经脱氧胆酸钠裂解的流感病毒样品，上样于Sepharose 6FF柱，纯化获得流感病毒疫苗原液；

(5)将以上步骤分别得到的H1N1、H3N2、B型流感病毒疫苗原液混合；

(6)按照每剂含H1N1流感病毒血凝素和H3N2流感病毒血凝素和B型流感病毒血凝素1～10微克、CpG ODN佐剂50～1000微克、poly I:C佐剂100～2000微克的配比，分装到喷鼻注射器即获得含CpG ODN和poly I:C佐剂的喷鼻型流感病毒疫苗。

2.根据权利要求1所述的一种含CpG ODN和poly I:C佐剂的喷鼻型流感病毒疫苗制备方法，其特征是：所述流感病毒浓缩过程中使用的超滤膜截留分子量为300～750kD。

3.根据权利要求1所述的一种含CpG ODN和poly I:C佐剂的喷鼻型流感病毒疫苗制备方法，其特征是：所述疫苗含每型流感病毒血凝素2～7.5微克/剂，CpG ODN佐剂100～250微克/剂、poly I:C佐剂200～500微克/剂。