[发明专利]使用包含特异性配体的亲和树脂的抗体纯化方法

摘要

本发明涉及用于抗体，例如单克隆抗体的新的纯化方法。所述方法利用包含在其上固定有一个或多个低分子量合成配体的固相材料的亲和树脂。所述亲和树脂能够从非常密切相关的蛋白质中分离出抗体。

主权项

1.一种用于抗体纯化的方法，所述方法包括以下步骤：(a)在促进所述抗体的一部分与亲和树脂结合的条件下，使含有所述抗体的溶液或悬液与所述亲和树脂接触；(b)任选用洗涤缓冲液洗涤含有结合抗体的所述亲和树脂；和(c)用洗脱缓冲液洗脱含有结合抗体的所述亲和树脂，并收集作为洗脱物的纯化抗体；其中所述亲和树脂是在其上共价固定有一个或多个以下通式(I)的配体的固相材料：其中i＝1，2，...，m，其中j＝1，2，...，n，其中n和m独立地为范围在0-3的整数，前提条件是n+m之和在1-4的范围之内，其中p、q和r独立地为范围在0-6的整数，A11，...，A1m和A21，...，A2n独立选自α-氨基酸部分、β-氨基酸部分、α-氨基磺酸部分和β-氨基磺酸部分，Z1和Z2独立选自氢、C_1-6烷基、羧酸部分(Z-C(＝O)-)和磺酸部分(Z-S(＝O)₂-)，其中Z选自氢、任选取代的C_1-12-烷基、任选取代的C_3-12-环烷基、任选取代的C_1-12-烯基、任选取代的C_1-12-炔基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂环基，R1和R2独立选自氢和C_1-6-烷基；X是用于将所述配体与所述固相材料连接的基团，无论是直接连接还是通过接头连接，X选自羧酸(-COOH)、羧酸酯(-COOR)、羧酸酐(-COOCOR)、羧酸酰卤(-COHal)、磺酸(-S(＝O)₂OH)、磺酰氯(-S(＝O)₂Cl)、巯基(-SH)、二硫化物(-S-S-R)、羟基(-OH)、醛(C(＝O)H)、环氧化物(-CH(O)CH₂)、氰化物(-CN)、卤素(-Hal)、伯胺(-NH₂)、仲胺(-NHR)、酰肼(-NH＝NH₂)和叠氮化物(-N₃)，其中R选自任选取代的C_1-12-烷基，Hal为卤素；和不包括“X”和任何接头的所述配体的总分子量为200-2000g/mol。