[发明专利]靶核酸序列的扩增方法、使用该方法的突变检测方法、以及用于该方法的试剂有效

专利信息
申请号: 200980125546.7 申请日: 2009-07-02
公开(公告)号: CN102076850A 公开(公告)日: 2011-05-25
发明(设计)人: 平井光春;细见敏也;井口亚希 申请(专利权)人: 爱科来株式会社
主分类号: C12N15/09 分类号: C12N15/09;C12Q1/68
代理公司: 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 代理人: 刘新宇;李茂家
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要: 提供一种能够在1个反应体系中灵敏度和可靠性优异地进行突变检测的突变检测方法。使用引物(Xmt)和(Xwt),以与作为检测目标的碱基为正常型的靶核酸序列的扩增效率相比更高的扩增效率,来扩增作为检测目标的碱基为突变型的靶核酸序列。(Xmt)为与模板核酸中包含突变型碱基的区域互补、且3’区域具有与突变型碱基互补的碱基的引物,(Xwt)为与模板核酸中包含正常型碱基的区域互补、且3’区域具有与正常型碱基互补的碱基的引物。(Xmt)对突变型模板核酸的扩增效率优选高于(Xwt)对正常型模板核酸的扩增效率。并且,对显示所得到的扩增产物与探针的杂交产物的熔解状态的信号值进行测定,由与温度变化相伴的信号值变动来确定目标碱基位点有无突变。
搜索关键词: 核酸 序列 扩增 方法 使用 突变 检测 以及 用于 试剂
【主权项】:
一种靶核酸序列的扩增方法,其特征在于,其为模板核酸中的靶核酸序列的扩增方法,所述靶核酸序列为所述模板核酸中包含发生作为检测目标的突变的碱基位点的序列,该方法包括如下扩增工序:在同一反应体系中,与所述碱基位点为正常型碱基的靶核酸序列相比,优先扩增所述碱基位点为突变型碱基的靶核酸序列。
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