[发明专利]一种高效分泌表达重组角质酶的基因工程菌及其构建方法有效
申请号: | 200910260984.6 | 申请日: | 2009-12-18 |
公开(公告)号: | CN101792729A | 公开(公告)日: | 2010-08-04 |
发明(设计)人: | 吴敬;陈晟;宿玲恰;陈坚;吴丹 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/16;C12R1/19 |
代理公司: | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人: | 王秀丽 |
地址: | 214122 江苏省无锡蠡湖大道*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 一种高效分泌重组角质酶的基因工程菌及其构建方法,属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带2种重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3),所述重组质粒为携带α-溶血素(α-hlyA)途径中特有基因的质粒pSTV28及含有角质酶-hlyAs基因的质粒pET20b(+)。该基因工程菌的构建:包括构建两个关键重组质粒并分别转化大肠杆菌BL21(DE3),获得高效分泌重组角质酶的基因工程菌。用所述的基因工程菌生产角质酶包括液体培养和诱导表达两个步骤。以嗜热单胞菌Thermobifida fusca WSH03-11角质酶Tfu_0883作为报告蛋白,摇瓶发酵表明角质酶胞外产量是306U/mL,为本研究室前期工作采用II型分泌途径产量的1.7倍,实现了角质酶的高效分泌表达。 | ||
搜索关键词: | 一种 高效 分泌 表达 重组 角质 基因工程 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种高效分泌表达重组角质酶的基因工程菌,其特征在于,该基因工程菌是携带2种重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3),所述重组质粒为携带α-溶血素(α-hlyA)途径中修订基因的质粒pSTV28及含有角质酶-hlyAs基因的质粒pET20b(+)。
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