[发明专利]一种同时检测三类镰刀菌毒素的快速分子检测方法与应用无效
| 申请号： | 200910250238.9 | 申请日： | 2009-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN102094080A | 公开（公告）日： | 2011-06-15 |
| 发明（设计）人： | 张昊;冯洁;徐进;许景升;潘哲超;张力勍;田茜 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
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| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明专用于检测三类最常见的镰刀菌毒素，属于植物检疫技术领域，具体的说涉及一种镰刀菌毒素的分子检测技术领域。该方法根据镰刀菌基因组内与毒素合成密切相关的Tri11基因，自行设计一组复合引物，从中国和国外采集得到的镰刀菌中检测分离得到镰刀菌毒素NIV、15ADON和3ADON的特异片段，该片段全长分别为643bp、424bp和342bp。本发明仅仅采用一组特异性引物，进行一次PCR扩增反应，利用1.5％琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，直接根据产物片断的长度，即可检测出禾谷镰刀菌产生的三种B型毒素的类型，本发明可应用于谷物、饲料和食品安全中毒素DON和NIV污染的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 同时 检测 镰刀 毒素 快速 分子 方法 应用 | ||
【主权项】：
用于检测三类镰刀菌毒素的特异性引物四条，primer A/B和primier E/F，其引物序列为：Primer A：5’‑CTTGTCAGGCGGCACAGTAG‑3’Primer B：5’‑AAGTATGGTCCAGTTGTCCGTATT‑3’Primer C：5’‑GCAAGTCTGGCGAGGCC‑3’Primer D：5’‑TCAAAGGCCAGAGCAACCC‑3’其中primer A/D引物对在产生雪腐镰刀菌烯醇(NIV)毒素的镰刀菌中特异性扩增出643bp的产物，primer B/D引物对产生15‑乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15ADON)毒素的镰刀菌中特异性扩增出424bp的产物，primer C/D引物对产生3‑乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3ADON)毒素的镰刀菌中特异性扩增出342bp的产物。
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