[发明专利]甘草中glycyrrhisoflavone的筛选方法﹑提取方法﹑含量测定方法及用途

摘要

本发明涉及甘草中glycyrrhisoflavone的筛选方法、提取方法、含量测定方法及用途。采用多种仪器分析方式，结合α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选方法，确认了甘草提取物中的glycyrrhisoflavone，并提供了从甘草中提取glycyrrhisoflavone的方法，该方法可最大限度的富集甘草中的glycyrrhisoflavone，该提取物可以进一步开发成为作为治疗与预防II型糖尿病的新型药物及保健食品上应用，本发明还提供了一种α-葡萄糖苷酶抑制剂的新的高效液相色谱定量方法，该方法快速、简便、重现性好，准确度高，为控制甘草及其产品的质量提供了可行的方案。

主权项

1.甘草中glycyrrhisoflavone的筛选方法，包括以下工艺过程：1)甘草乙醇提取物(LF)用水悬浊后使用乙酸乙酯萃取得到乙酸乙酯层LE。2)利用silica对LE进行柱层析，依次使用氯仿，氯仿-甲醇和氯仿-甲醇-水系统进行梯度洗脱，对流出液依照硅胶薄层层析结果进行合并，得到14个分离部位LE1-14；在1mg/mL浓度下进行α-葡萄糖苷酶抑制活性测定，LE8对蔗糖酶和麦芽糖酶的抑制活性最高。3)利用反相ODS硅胶柱对LE8进行层析，使用甲醇-水和甲醇系统进行洗脱，得到2个分离部位LE81，LE82，分离部位LE81对蔗糖酶和麦芽糖酶的抑制活性最高。4)LE81上高效液相色谱，使用甲醇-水-含三氟乙酸进行洗脱，得到9个分离部位LE811-819；分离部位LE818在1mg/mL浓度对蔗糖酶和麦芽糖酶的抑制活性最高。5)通过核磁共振法确定了LE818的结构，为化合物glycyrrhisoflavone，其分子式为：C₂₀H₁₈O₆，化学结构式为：