[发明专利]黄瓜绿斑驳花叶病毒一步RT-PCR检测试剂盒及其检测方法无效
| 申请号： | 200910113063.7 | 申请日： | 2009-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN101845513A | 公开（公告）日： | 2010-09-29 |
| 发明（设计）人： | 翁瑞泉;沈建国;王念武;翁泽斌;陈劲松;林双庆 | 申请（专利权）人： | 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/94 |
| 代理公司： | 福州智理专利代理有限公司 35208 | 代理人： | 丁秀丽 |
| 地址： | 350003 福建*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明涉及黄瓜绿斑驳花叶病毒一步RT-PCR检测试剂盒及其检测方法，该试剂盒包括一步RT-PCR反应的各种试剂如下：黄瓜绿斑驳花叶病毒的上游引物，黄瓜绿斑驳花叶病毒的下游引物，PCR Buffer，Mgcl2，dNTPs，RNA酶抑制因子，反转录酶，DNA聚合酶，含有黄瓜绿斑驳花叶病毒的阳性对照，不含有黄瓜绿斑驳花叶病毒的阴性对照，RNase-free ddH2O。本发明不仅制作方法简单，便于大规模产业化生产，而且检测方法具有操作简便、灵敏度高、特异性强和准确度好的优点，整个检测过程在一个PCR管内一步完成，既简化操作程序、缩短检测时间，又避免交叉污染、提高检测效率，适合大批量样品的快速检测。 | ||
| 搜索关键词： | 黄瓜 斑驳 花叶 病毒 一步 rt pcr 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】：
一种黄瓜绿斑驳花叶病毒一步RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：1)A#管，内装黄瓜绿斑驳花叶病毒的上游引物，浓度为10μmol/L，引物序列为5’-TGCTTCTTATGTTCCCGTCA-3’；2)B#管，内装黄瓜绿斑驳花叶病毒的下游引物，浓度为10μmol/L，引物序列为5’-GCCCATAGAAACTTCAACGTC-3’；3)C#管，内装PCRBuffer，浓度为10×；4)D#管，内装Mgcl2，浓度为25mmol/L；5)E#管，内装dNTPs，浓度为10mmol/L；6)F#管，内装RNA酶抑制因子，浓度为40U/μL；7)G#管，内装反转录酶，浓度为5U/μL；8)H#管，内装DNA聚合酶，浓度为5U/μL；9)I#管，内装含有黄瓜绿斑驳花叶病毒的阳性对照CK+；10)J#管，内装不含有黄瓜绿斑驳花叶病毒的阴性对照CK-；11)K#管，内装RNase-free ddH2O。
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