[发明专利]利用迷你内含子蛋白介导人胰高血糖素样肽(GLP-1)的制备无效
| 申请号： | 200910026562.2 | 申请日： | 2009-05-12 |
| 公开（公告）号： | CN101886105A | 公开（公告）日： | 2010-11-17 |
| 发明（设计）人： | 刘建宁;孙自勇;蒋爱芹 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C12N15/62;C12N15/63;C12N1/21;C07K14/605;C07K1/16;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210093*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明利用微型蛋白内含子制备胰高血糖素样肽-1。Ssp DnaB蛋白质内含子(intein)其N-末端的106个氨基酸(inteinN)和C-末端的48个氨基酸(intein C)，形成的Ssp DanB微型蛋白质内含子具有完整的剪接功能。将intein C与胰高血糖素样肽-1融合蛋白(inteinC-GLP)在大肠杆菌内进行表达，intein N在大肠杆菌中进行表达，并以Ni-Sepharose进行纯化。纯化后的inteinC-GLP与intein N在pH6.2的磷酸盐缓冲体系中进行拼接，释放出重组胰高血糖素样肽-1。拼接产物上样于Ni-Sepharose，GLP-1存在于穿过液中，其它蛋白被吸附于Ni-Sepharose柱上。将GLP-1粗品进一步浓缩纯化得到纯品，MALDI-TOF质谱分析，与理论分子量相符合。葡萄糖耐受实验结果证明，与对照相比GLP-1(7-36)能有效降低小鼠血糖水平。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 迷你 内含 蛋白 介导人胰高 血糖 素样肽 glp 制备 | ||
【主权项】：
通过迷你内含子蛋白(intein)介导胰高血糖素样肽的制备。
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