[发明专利]一种建立兰州百合农杆菌介导高效转化体系的方法无效
| 申请号： | 200910023366.X | 申请日： | 2009-07-17 |
| 公开（公告）号： | CN101748146A | 公开（公告）日： | 2010-06-23 |
| 发明（设计）人： | 马锋旺;师守国;冯凤娟;李永红;李善菊;梁东;王爱莲 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82 |
| 代理公司： | 西安西达专利代理有限责任公司 61202 | 代理人： | 李文义 |
| 地址： | 712100 陕西省咸阳市杨*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种建立兰州百合农杆菌介导高效转化体系的方法，以切取组培苗鳞片分化培养基上暗培养2天作为受体材料；将供体菌株接种到加有卡那霉素、链霉素和利福平的LB液体培养基上培养，收集菌液，离心，倒去上清，沉淀用液体MS溶解并稀释至浓度OD600为0.4～0.6加入液体MS中，放入受体材料进行侵染，把侵染过的鳞片放到滤纸上吸干，接种到含有20mg/LAS和200mg/L头孢霉素的分化培养基上暗培养3d，而后接种到含有2mg/L代表潮霉素的分化培养基上，26℃暗培养直至长出抗性芽；将抗性芽行进一步的筛选培养，待生长至4～5片叶子时，进行生根培养，而后进行移栽。为培育优良水稻品种开辟了新的途径。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 建立 兰州 百合 杆菌 高效 转化 体系 方法 | ||
【主权项】：
一种建立兰州百合农杆菌介导高效转化体系的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)切取组培苗鳞片在分化培养基上暗培养2天作为受体材料；2)将供体菌株接种到加有卡那霉素、链霉素和利福平的LB液体培养基上培养，收集菌液，离心，倒去上清，沉淀用液体MS溶解并稀释至浓度OD600为0.4～0.6；3)将步骤2)制备的菌液加入液体MS中，放入受体材料进行侵染，把侵染过的鳞片放到滤纸上吸干，接种到含有20mg/L AS和200mg/L头孢霉素的分化培养基上暗培养3d，而后接种到含有2mg/L代表潮霉素的分化培养基上，26℃暗培养直至长出抗性芽；4)将抗性芽移植到继代培养基上进行进一步的筛选培养，待生长至4～5片叶子时，进行生根培养，而后进行移栽。
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