[发明专利]从食品样品中简易提取细菌DNA的方法无效
| 申请号： | 200810182554.2 | 申请日： | 2008-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN101748175A | 公开（公告）日： | 2010-06-23 |
| 发明（设计）人： | 王磊;王敏;曹勃阳;杨斌 | 申请（专利权）人： | 天津生物芯片技术有限责任公司 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京连和连知识产权代理有限公司 11278 | 代理人： | 姜兆元 |
| 地址： | 300457 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从食品样品中简易提取细菌基因组DNA的方法，其主要包含步骤：以含有细菌的食品为样品，过夜培养，离心富集菌体，然后用无菌水充分洗涤，得沉淀物；使用含KCl，Tris-HCl，MgCl2和蛋白酶K的裂解液重悬上述的沉淀物，得重悬液；对所得的重悬液进行第一次水浴，裂解细菌细胞，然后再经第二次水浴；将所得物进行离心，获得含所述细菌基因组DNA的中层上清；收集上清，烘干，即制得所述细菌基因组DNA。使用本发明的方法，可充分裂解革兰氏阳性和革兰氏阴性(G+、G-)菌的细胞壁，同时由于裂解液中加入了蛋白酶K，并加热煮沸，使得蛋白凝固变性，提高了DNA的提取效率和纯度。 | ||
| 搜索关键词： | 食品 样品 简易 提取 细菌 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种从食品样品中提取细菌基因组DNA的方法，其特征在于包含步骤：1)以含有细菌的食品为样品，过夜培养，离心富集菌体，然后用无菌水充分洗涤，得沉淀物；2)使用含KCl，Tris-HCl，MgCl2和蛋白酶K的裂解液重悬步骤1)所得的沉淀物，得重悬液；3)将步骤2)所得的重悬液进行第一次水浴，裂解细菌细胞，然后再经第二次水浴；4)将步骤3)的所得物进行离心，获得含所述细菌基因组DNA的中层上清；5)收集步骤4)的含所述细菌基因组DNA的中层上清，烘干，即制得所述细菌基因组DNA。
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