[发明专利]一种从雷公藤叶中分离雷公藤内酯醇的方法

摘要

本发明公开了一种从雷公藤叶中分离雷公藤内酯醇的方法，雷公藤叶粉末通过乙醇提取，乙醇提取物先用乙酸乙酯—水体系分配，上相蒸干得到乙酸乙酯萃取物，乙酸乙酯萃取物再用石油醚—甲醇体系分配，下相蒸干得到甲醇萃取物，通过以上两次分配减少了柱层析步骤的上样量。经过简单柱层析，蒸干洗脱剂得到雷公藤内酯醇粗品，用四元两相体系对该粗品进行分配，除去色素等杂质，减少了高速逆流色谱步骤的上样量，最后通过高速逆流色谱精制得到了雷公藤内酯醇精品，其纯度在95％左右，相对干叶子得率在0.008％以上。本方法所涉及到的溶剂不含对环境和人体损害较大的氯代溶剂。

主权项

1、一种从雷公藤叶中分离雷公藤内酯醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将雷公藤叶磨成粉末，过筛，用乙醇回流提取2～4次，每次提取时间1～3小时，每次每克雷公藤叶粉末用4-6毫升乙醇，然后合并提取液，蒸干乙醇得到乙醇提取物。(2)乙醇提取物用乙酸乙酯和水搅拌溶解并过滤，每克乙醇提取物需加入饱和了水的乙酸乙酯5-20毫升，加入饱和了乙酸乙酯的水5-20毫升，滤液分层12-24小时，分液，上相蒸干得到乙酸乙酯萃取物。(3)乙酸乙酯萃取物用60-90℃石油醚和甲醇溶解，每克乙酸乙酯萃取物需加入饱和了60-90℃石油醚的甲醇5-20毫升，加入饱和了甲醇的石油醚5-20毫升，滤液分层1-10小时，分液，下相蒸干得到甲醇萃取物。(4)甲醇萃取物上硅胶柱层析，每克甲醇萃取物吸附在一克硅胶上，每克甲醇萃取物需硅胶填料50～100克，需用体积比为1∶0.8～1.2的正己烷和乙酸乙酯的混合物250～500毫升洗脱，洗脱液浓缩蒸干得到雷公藤内酯醇粗品。(5)雷公藤内酯醇粗品用正己烷～乙酸乙酯～乙醇～水所构成的四元两相体系分配，所述正己烷、乙酸乙酯、乙醇和水体积比为7～10∶2～4∶4～6∶4～6，分液，下相蒸干得到四元分配物。(6)四元分配物上高速逆流色谱进行精制，所用的溶剂体系为正己烷～乙酸乙酯～乙醇～水，所述正己烷、乙酸乙酯、乙醇和水的体积比为3～5∶4～6∶3～5∶4～6，置于分液漏斗中，摇匀、静置分层，平衡后，将上、下相分开。用上相作固定相，下相作流动相，用上相充满整个高速逆流色谱中色谱柱，调整高速逆流色谱主机正转，将下相从柱子的首端泵入柱内进行洗脱，待整个体系建立动态平衡后由进样阀进样；或者下相作为固定相，上相作流动相，用下相充满整个高速逆流色谱中色谱柱，调整高速逆流色谱主机正转，将上相从柱子的尾端泵入柱内进行洗脱；待整个体系建立动态平衡后，由进样阀进样；根据检测器的谱图分步收集目标物，减压浓缩得到雷公藤内酯醇精品。